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苜蓿品种对豌豆蚜抗性及其机理研究的任务书
一、任务背景
苜蓿是我国主要的饲料作物之一，具有丰富的营养，被广泛应用于饲料生产和土壤改良。但是，在苜蓿生产中，豌豆蚜成为了一种较为严重的害虫。豌豆蚜危害苜蓿主要表现为吸食植株汁液，引起叶片变黄、畸形、叶片干枯等症状。传统防治方法主要是采用化学药剂喷洒，但是长期喷洒会导致药剂残留和环境污染，同时也会降低土壤微生物数量和生物多样性。因此，利用苜蓿自身抗性作为生物防治手段是目前较为关注的研究方向。
二、任务目的
本研究目的是通过对不同苜蓿品种对豌豆蚜的抗性及其机理的研究，寻找到对豌豆蚜抗性较好的苜蓿品种，为开展苜蓿生物防治提供科学依据。同时，深入了解苜蓿对豌豆蚜的抗性机理，揭示其在分子水平上的作用机制，为提高苜蓿自身防御能力提供参考。
三、任务内容
（一）寻找具有抗豌豆蚜能力的苜蓿品种
选择三个常见的苜蓿品种，分别为混合制种苜蓿、恒源1号苜蓿、绍兴春苜蓿。通过室内人工接种的方法，观察、记录不同苜蓿品种的豌豆蚜侵害程度及其生长发育情况，筛选出具有抗豌豆蚜能力相对较强的苜蓿品种。
（二）研究苜蓿抗性的机理
1.观察豌豆蚜在不同苜蓿品种间的适应能力
选择豌豆蚜数量相对稳定的苜蓿品种和逐渐适应不同苜蓿品种的豌豆蚜，通过光镜和电镜观察触角、口器、触手、感觉器官等结构分化差异，及分泌物的种类和数量，揭示适应不同苜蓿品种的豌豆蚜生理生态特征的差异。
2.分析苜蓿中抗豌豆蚜相关基因的表达及其调控机制
收集不同处理的苜蓿植株，进行qPCR或RNA-seq技术分析基因表达情况，寻找与豌豆蚜的抗性相关的基因，研究其表达模式与时间的变化。并从施肥模式、蚜虫侵染时间等方面进行角度分析基因的调控机制。
3.筛选苜蓿共存菌株及其作用机理
收集不同苜蓿品种的微生物组，通过16SrRNA分析苜蓿共存菌株的种类及其丰度，寻找对抗豌豆蚜有积极作用的共存菌株。同时，对共存菌株的生物学特性及其对苜蓿内源物质的作用机制进行研究。
四、研究方法
1.苜蓿品种选取和豌豆蚜接种方法
选取混合制种苜蓿、恒源1号苜蓿、绍兴春苜蓿，人工采集病情严重、病情轻微的豌豆蚜，进行苜蓿的接种。豌豆蚜按照固定的数量进行接种，苜蓿的生长发育情况及豌豆蚜侵害程度每隔一周进行一次观察和记录。
2.观察豌豆蚜在不同苜蓿品种间的适应能力
采用光镜和电镜、实时荧光作为分析手段，分析豌豆蚜的生物学特性及其与苜蓿之间的相互作用。
3.分析苜蓿中抗豌豆蚜相关基因的表达及其调控机制
通过RNA-seq和qPCR分析肉眼可见差异。
4.筛选苜蓿共存菌株及其作用机理
通过16SrRNA分析苜蓿共存菌株的种类和丰度，同时对其生物学特性及其对苜蓿内源物质的作用进行研究。
五、研究预期结果
本研究旨在通过对不同苜蓿品种对豌豆蚜抗性及其机理的研究，得出如下预期结果：
1.筛选出对豌豆蚜抗性较强的苜蓿品种，并比较不同品种对豌豆蚜的抗性差异。
2.分析豌豆蚜在不同苜蓿品种间的适应能力，揭示豌豆蚜适应不同苜蓿品种的机理。
3.分析苜蓿中抗豌豆蚜相关基因的表达及其调控机制，深入揭示苜蓿抗豌豆蚜的分子机理。
4.筛选苜蓿共存菌株及其作用机理，为苜蓿生物防治提供新的思路和方法。