昆明白小鼠胚胎干细胞系及转基因小鼠模型的建立的任务书.docx

昆明白小鼠胚胎干细胞系及转基因小鼠模型的建立的任务书
任务书：昆明白小鼠胚胎干细胞系及转基因小鼠模型的建立
1.背景和意义
昆明白小鼠是一种常用的小型实验动物，因其生长快、相对便宜、较易于饲养以及适合进行某些实验而备受欢迎。然而，昆明白小鼠的一些缺点，如生殖异常、发育异常等，限制了其在一些实验中的应用。近年来，随着生物技术的广泛应用，转基因小鼠已成为许多生物医学研究的重要模型，但由于昆明白小鼠的生殖特性等原因，转基因昆明白小鼠模型的建立尚面临一定的困难。
干细胞研究是生物技术研究中的热点之一，胚胎干细胞是一种拥有较强分化潜能的细胞，是制备转基因小鼠模型的重要来源。因此，建立昆明白小鼠胚胎干细胞系，有助于解决昆明白小鼠在转基因研究中的瓶颈问题。同时，转基因小鼠模型建立的成功，也将对基础医学和生物科学等领域的研究起到重要的推动作用。
2.研究内容和方法
2.1建立昆明白小鼠胚胎干细胞系
2.1.1提取昆明白小鼠八细胞期胚胎
从雌性昆明白小鼠的卵巢中获取卵母细胞，在体外培养后与精子结合受精，获得受精卵。受精卵培养到八细胞期后，提取细胞质，得到八细胞期胚胎。
2.1.2分离和培养胚胎干细胞
分离八细胞期胚胎的内细胞团，将其培养于含有胚胎干细胞生长因子的培养基中，经多代传递并筛选，得到昆明白小鼠胚胎干细胞系。
2.1.3鉴定和鉴定胚胎干细胞的多向分化潜能
用鉴定胚胎干细胞的特异性标志物、形态学和染色体拷贝数等方式进行鉴定，并通过多种分化诱导方法验证其多向分化潜能。
2.2建立昆明白小鼠转基因模型
2.2.1选择转基因目标基因和转座子
选择合适的转基因目标基因和转座子，设计和构建转基因载体。
2.2.2转基因载体导入昆明白小鼠胚胎干细胞系
通过电转染、化学转染或病毒转染等方式将转基因载体导入昆明白小鼠胚胎干细胞系中。
2.2.3通过筛选和鉴定获得转基因昆明白小鼠模型
对转基因昆明白小鼠胚胎干细胞系进行获得和筛选，鉴定获得的转基因昆明白小鼠模型是否达到预期目标。
3.研究意义和预期结果
3.1建立昆明白小鼠胚胎干细胞系，有助于解决昆明白小鼠在转基因研究中的瓶颈问题，提高昆明白小鼠在生物医学研究中的应用价值。
3.2建立昆明白小鼠转基因模型，有助于关键基因的功能研究和药物筛选的开展，同时也为昆明白小鼠在遗传研究中的应用提供了新的方法和途径。
3.3预期结果为建立完整的昆明白小鼠胚胎干细胞系和转基因昆明白小鼠模型，为昆明白小鼠的遗传改造和功能研究提供完整的技术支持和研究平台。
4.研究进度和进展
第一年：完成昆明白小鼠八细胞期胚胎的提取、昆明白小鼠胚胎干细胞系的建立和鉴定、转基因载体的构建和昆明白小鼠胚胎干细胞系的转染等。
第二年：继续筛选转基因昆明白小鼠模型，对其进行鉴定和功能分析，并进行实验结果分析和总结。
第三年：进行胚胎干细胞模型和转基因昆明白小鼠模型的各项检测和对照，归纳和总结研究成果，撰写研究报告。
5.仪器设备和材料需求
5.1供应昆明白小鼠母体及雄性小鼠，保证实验动物的数量和质量。
5.2购买显微镜、离心机、细胞培养箱、转基因载体构建试剂盒、转基因载体导入试剂盒、多向分化试剂盒等相关设备，保证实验器材和设备的质量和使用效果。
5.3购买所需胚胎干细胞培养基、传代三胎STO细胞等相关试剂和材料，保证实验实证的原材料和质量。
6.参考文献
1.YangBY,ZhuXL,LiuL,etal.EstablishmentandcharacterizationofembryonicstemcelllinesfromChineseKunmingmice[J].StemCellsInt,2017,2017:1-19.
2.YingQL,WrayJ,NicholsJ,etal.Thegroundstateofembryonicstemcellself-renewal[J].Nature,2008,453(7194):519-523.
3.TestaG,ZhangY,VinterstenK,etal.Engineeringthemousegenomewithbacterialartificialchromosomestocreatemultipurposealleles[J].NatureBiotechnology,2003,21(4):443-447.