烟草中NAC类转录因子基因的克隆与分析的任务书.docx

烟草中NAC类转录因子基因的克隆与分析的任务书
任务书
任务名称：烟草中NAC类转录因子基因的克隆与分析
任务目的：本任务的主要目的是通过克隆烟草中NAC类转录因子基因并进行分析，探究其对植物生长发育和逆境应答的影响，为基因工程育种提供理论依据，丰富烟草基因资源库。
任务内容：
1.烟草基因组中NAC类转录因子筛选：通过烟草基因组数据库检索，筛选出NAC类转录因子潜在的编码基因。
2.基因克隆：将PCR扩增所需基因序列，利用质粒载体或合成的骨架进行基因克隆。
3.构建表达载体与转化烟草：将克隆所得基因序列与相应载体进行连接，构建表达载体，并通过农杆菌介导法转化烟草。
4.分析基因表达：收取转化之后的植株样品，提取RNA，进行逆转录合成cDNA，利用荧光定量PCR技术检测基因表达的变化。
5.基因功能分析：通过FvCBF1基因转化烟草展开抗冻研究，通过pyrrolidinecarboxylicacid对照检测FvCBF1基因对植物耐冷性能的影响。
任务重点：
1.烟草基因组中NAC类转录因子筛选：通过搜索烟草基因组数据库，筛选出潜在的NAC类转录因子编码基因。
2.基因克隆：确定目标基因序列并选择质粒载体，进行PCR扩增和连接，确保基因克隆成功。
3.构建表达载体与转化烟草：确定合适的质粒载体，通过农杆菌介导法将表达载体导入烟草中。
4.分析基因表达：利用荧光定量PCR技术检测基因表达的变化，确保目标基因在转化过程中被高效地表达。
5.基因功能分析：研究转化烟草的生长发育和逆境应答变化，通过对照实验检测NAC类转录因子基因的作用。
任务预期成果：
完成本任务后，预期可以获得以下成果：
1.克隆并鉴定烟草中的NAC类转录因子基因。
2.构建可以高效表达目标基因的表达载体，并成功转化进入烟草中。
3.基因表达分析结果，揭示NAC类转录因子基因在烟草发育和逆境应答中的作用。
4.发表相关研究论文，丰富烟草的基因资源库，为烟草育种提供理论依据。
任务进度安排：
本任务的时间预计为6个月，具体进度安排如下：
第1-2个月：烟草基因组中NAC类转录因子筛选和基因克隆。
第3-4个月：构建表达载体并转化烟草，筛选目标基因的阳性植株。
第5个月：基因表达分析和对照实验。
第6个月：统计和分析结果，整理论文，发表相关论文和成果报告。
注意事项：
1.完成任务前，需了解烟草的生长发育特性和逆境应答机制，对基因克隆和表达特性有一定的基因工程学、生物学基础。
2.在任务执行过程中，注意样品的获取、存储和处理过程中的标准化和规范化，尽量减少误差的产生。
3.完成任务后，需按照要求制作完整的报告和论文，并及时上交。
4.在执行任务期间，应及时向任务指导老师报告任务进展和结果，及时解决任务执行中的学术问题。