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会计学主要内容RealTimePCR基础知识RealTimePCR的用途(yòngtú)RealTimePCR的原理(yuánlǐ)RealTimePCR基础知识荧光(yíngguāng)染料嵌合法(SYBRGreenI)主要内容RTPrimer的选择(xuǎnzé)RealTimePCR引物设计(shèjì)两条引物的Tm值尽量接近,应用专用软件计算Tm值探针的Tm比引物高8-10℃线性关系、扩增效率(xiàolǜ)确认主要内容标准(biāozhǔn)曲线制作标准(biāozhǔn)品的种类质粒标准(biāozhǔn)品构建流程体外转录RNA标准(biāozhǔn)品构建流程理想的标准(biāozhǔn)品扩增曲线理想(lǐxiǎng)的标准曲线RealTimePCR解析(jiěxī)方法融解曲线(qūxiàn)分析特异性产物(chǎnwù)绝对定量(dìngliàng)解析方法绝对定量(dìngliàng)解析方法相对定量解析(jiěxī)方法相对定量解析(jiěxī)方法主要内容绝对定量应用(yìngyòng)例对SARS样品中所含SARS病毒RNA进行定量纯化(chúnhuà)的SARSControlRNAOD值测定结果探针(tànzhēn)的选择相对定量应用例分析小鼠不同组织中PAH基因表达量的变化(biànhuà)情况 TotalRNA提取(tíqǔ)提取TotalRNA后电泳(diànyǒnɡ)照片目的基因标准曲线制作(zhìzuò)结果扩增曲线图通过双标准曲线方法计算得出,苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因(jīyīn)在小 鼠肝脏中的表达量明显高于其在脑组织中的表达水平,二者的表达量比 例约为3757:1。RealTimePCR试剂(shìjì)RealTimeRT-PCR试剂(shìjì)