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褪黑素对脂多糖刺激小鼠抗氧化与免疫功能的影响的任务书 任务书 一、任务背景 褪黑素是由松果体分泌的一种激素,它在人体内具有调节昼夜节律和免疫功能的作用。除此之外,近年来发现褪黑素还有抗氧化、抗炎等多种生物学活性,因此受到越来越多的关注。脂多糖是一类存在于细菌细胞壁上的大分子多糖,其结构独特,具有强烈的抗原性和毒性。大量脂多糖进入人体后,会激发炎症反应,激活免疫细胞,释放炎性介质,导致细胞损伤和器官功能障碍。因此,探究褪黑素对脂多糖刺激小鼠抗氧化与免疫功能的影响,对于研究其生物学作用及开发褪黑素相关治疗药物具有重要的意义。 二、任务目的 本次任务的目的是通过动物实验,探究褪黑素对脂多糖刺激小鼠抗氧化和免疫功能的影响,为进一步研究褪黑素的生物学作用提供理论依据。 三、实验设计 1.实验动物:C57BL/6小鼠,雄性,7周龄,体重20±2g,自由进食自来水和标准食物。动物来自某一动物繁殖实验室并经过一周的适应期。 2.实验分组:随机分为对照组、模型组、低剂量褪黑素组(5mg/kg)、高剂量褪黑素组(10mg/kg),每组10只。 3.实验操作: (1)所有小鼠饮食和饮水自由,环境温度和湿度控制在22℃±2℃和60%±5%。 (2)对照组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃,低剂量和高剂量褪黑素组在灌胃前分别给予5mg/kg和10mg/kg的褪黑素。 (3)实验第一天,在灌胃半个小时后,给予腹腔注射4mg/kg的脂多糖制备腹膜炎模型。 (4)实验第4天,采集小鼠末次注射后24小时的血液标本,分离血浆和白细胞。 (5)检测实验小鼠血浆总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活力、总氧化状态、谷胱甘肽过氧化物酶活力等指标;检测小鼠白细胞计数、干细胞因子分泌等免疫功能指标。 4.数据分析:采用SPSS22.0软件对数据进行统计分析,使用方差分析(ANOVA)和多重比较法分析各组之间差异,P<0.05为统计学差异。 四、安全措施 1.动物实验需符合国家有关动物使用和管理规定,遵循实验室动物伦理原则和操作规程,保护实验动物的福利。 2.对实验操作中可能对小鼠造成伤害的操作采取适当的麻醉和镇痛措施,避免实验造成严重后果。 3.实验操作人员应对实验过程中涉及到的药品和生物样本进行正确的标记、储存和处理,避免对环境和自身造成危害。 五、参考文献 1.MuellerA,etal.AntagonismofCD11bwithneutrophilinhibitoryfactor(NIF)regulatespulmonaryinflammationinamodelofmeningococcalsepsis.PLoSOne.2018Dec13;13(12):e0208571. 2.O'CallaghanKM,etal.DivergentrequirementsforCCR2inleukocyterecruitmentduringbacterialinfectionoftheskinandliver.Immunology.2019Jan30. 3.GoodyearCS,SilvermanGJ.DeathbyaBcellsuperantigen:invivoVH-targetedapoptoticsupraclonalBcelldeletionbyaStaphylococcalToxinrevealsaPotent,protectiverolefornaturalIgM.JImmunol.2013Dec1;191(11):5651-63. 4.ZhangJ,etal.Reducingapoptoticcellnumberselicitedbyradiationtherapy:roleofsolubleTNFreceptors.IntJRadiatOncolBiolPhys.2015Mar1;91(3):581-9.