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邻苯二甲酸二丁酯降解菌的分离及降解机理研究的任务书 任务书 任务题目:邻苯二甲酸二丁酯降解菌的分离及降解机理研究 研究背景 邻苯二甲酸二丁酯(Dibutylphthalate,DBP)是一种广泛用于喷漆、塑料、胶水、印刷等工业中的化学品。然而,DBP的广泛使用已经引起环境污染,甚至对生物体造成危害。DBP的降解主要依赖于微生物的降解能力,因此了解DBP的降解机理及分离有效降解菌对缓解DBP引起环境污染具有重要意义。 任务目标 本次任务旨在通过分离并纯化有效的DBP降解菌,探究DBP在菌体内的代谢途径及其降解机理。 任务内容 1.采样 采用筛选法对污染环境中的土样、水样、沉积物等样品进行采集,重复采集3次以上,将其保存在50ml离心管中。 2.细菌分离培养 在50mlLB(Luria-Bertani)培养基中添加1g所采集样品,培养基中添加0.1g/ml的红霉素,25℃下静置48h,以筛选出表现出对DBP潜在的降解能力。再将该样品涂抹在LB固体培养基上,静置48h,筛选出可溶解LB平板培养基的细菌菌株。 3.纯化菌株 利用菌液经过分离纯化步骤,通过取单个菌落从头开始进行单菌株分离纯化,单菌株培养、抗性鉴定及酶学测定,获得一个DBP降解能力较强和生长较快的分离纯化菌株。 4.降解实验 选取可降解DBP的菌株进行降解实验,将该菌株接种在含有DBP的最小酸液培养基中,培养30h。并且在间断添加DBP的情况下观察其对DBP的降解能力。 5.降解机理研究 通过GC-MS技术对DBP降解前、后的代谢产物进行分析,呈现出分解路线。同时,通过测定菌株的酶活性,研究酶在DBP降解过程中的作用。 6.数据分析与结果输出 收集分离纯化菌株的鉴定、降解实验、降解机理研究的历程信息,分析数据结果,完成研究报告输出。 任务成果 1.成功分离出具有降解邻苯二甲酸二丁酯能力的细菌菌株。 2.探索了该菌株的DBP分解机理和代谢特征。 3.发表研究报告,并按照要求提交实验记录和实验数据分析报告。 任务时间表 第一阶段(5天):采样、分离菌株、纯化单菌 第二阶段(10天):降解实验,采集产物,分析代谢产物 第三阶段(5天):分析实验数据,撰写研究报告 备注 本任务需要实验室条件,安全注意事项需员工严格遵守实验操作流程,如实验过程中发现任何异常情况时,请立即向主管汇报处理。