微生物学微生物生长繁殖与控制学习教案.pptx

会计学第一节微生物的生长(shēngzhǎng)与繁殖微生物的个体生长(shēngzhǎng)和群体生长(shēngzhǎng)一、微生物的个体(gètǐ)生长与繁殖细胞壁合成(héchéng)模式2、细菌拟核DNA的复制与分离细菌的拟核（nucleoid）即染色体（bacterialchromosome）是一环形双链DNA分子。细菌细胞在生长过程中，其双链环形DNA分子在一个特定位置上起始复制，该位置称为复制原点，也称复制起点。复制原点是一约由300个碱基组成的特异序列(xùliè)，它能被特异的起始蛋白所识别；DNA复制从原点开始，向两个相反的方向延伸，最终形成两个子染色体DNA分子。在细胞分裂形成的两个子代细胞中，分别含有一个遗传信息完整的拟核。细菌(xìjūn)染色体的复制//二、微生物的群体生长(shēngzhǎng)规律（一）、细菌(xìjūn)纯培养生长曲线/细菌生长(shēngzhǎng)曲线的分期1.滞留(zhìliú)适应期（Lagphase）l产生原因：
（1）接种后，一时还缺乏分解或催化有关底物的酶，或缺乏充足的中间代谢产物。
（2）暂时缺乏足够的能量和必需的生长因子。
（3）“种子”老化或未充分活化。
l影响因素
（1）菌种类型(lèixíng)
（2）种龄、即生理年龄
（3）接种量
（4）培养基成分：营养丰富度与接近度
l缩短措施
（1）通过遗传育种方法改变种的遗传特性使延缓期缩短
（2）利用“对数生长期”的细胞作为种子。
（3）尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大。
（4）适当扩大接种量。2.对数(duìshù)期（Logphase）l应用意义
指数期的微生物因其具有整个群体的生理特性较为(jiàowéi)一致、细胞各成分平衡增长和生长速率恒定等优点，故是用作代谢、生理等研究的良好材料，是增殖噬菌体的最适宿主，也是发酵工业中用做种子的最佳材料。3.稳定期（Stationaryphase）l稳定期到来的原因：
（1）营养物质尤其是生长限制因子的耗尽。
（2）营养物的比例失调，如C/N比不合适。
（3）酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产物的积累。
（4）Ph、氧化还原势等物理化学条件越来越不适宜。
l控制措施
（1）补充营养物质
（2）移走代谢产物
（3）改善培养(péiyǎng)条件
l意义：
（1）是产物最佳的收获期，主要是对以菌体生产或与菌体生长相平行的代谢产物为目的的某些发酵生产。
（2）对维生素、碱基、氨基酸等物质是最佳的生物测定时期。
（3）通过对稳定期到来的原因的研究，还促进连续培养(péiyǎng)原理的提出和工艺、技术的创建。4.衰亡(shuāiwáng)期（Deathphase）第二节微生物的培养(péiyǎng)与生长量测定获得(huòdé)纯培养的技术稀释(xīshì)分离法稀释(xīshì)倒平板法（pourplatemethod）//一、微生物纯培养(péiyǎng)技术二、分批培养与连续培养（二）、连续培养连续培养方式(fāngshì)连续培养法装置恒浊与恒化培养控制(kòngzhì)装置分批培养与连续培养的比较(bǐjiào)分批培养与连续培养的优缺点比较(bǐjiào)及其运用(p159)三、同步(tóngbù)培养获得(huòdé)微生物同步生长的方法四、微生物生长量的测定(cèdìng)1.直接(zhíjiē)计数法（全数法）2.间接(jiànjiē)计数法（活菌计数法）平板(píngbǎn)菌落计数法液体(yètǐ)稀释培养测数（MostProbableNumbermethod,MPN法）/薄膜过滤(guòlǜ)计数法3.测定(cèdìng)细胞物质量1.测定细胞干重法
将单位体积的液体培养基中培养的微生物,经过滤或离心收集菌体细胞,用水洗净附在细胞表面的残留培养基,105℃高温或真空下干燥至恒重,称重,即可求得培养物中的总生物量。
含量测定法
DNA可与DABA一HCl(35.二氨基苯甲酸一盐酸)溶液反应(fǎnyìng)显示特殊的荧光。根据这种荧光反应(fǎnyìng)强度求得DNA含量。含量测定法微生物细胞中都含有相对恒定量的ATP,而ATP与生物量之间有一定的比例关系。用适当的试剂从培养(péiyǎng)物中提取出ATP,以分光光度计测定它的荧光素一荧光素酶反应强度,经换算即可求得生物量。
4.代谢活性法该法是通过测定生活细胞的代谢活性强度来估算其生物量。
5.蛋白质量测定法蛋白质是细胞R的主要组分，而蛋白质的含量是比较稳定的。可以从蛋白质量的测定求出细胞物质量，或以测定芳香氨基酸量求蛋白质量。可以测定全氮量来求蛋白质量。
蛋白质量=氮量；
方法：菌体分离→洗涤→凯氏微量定氮法测定总氮含量。第三节：环境条件对微生物生长(shēngzhǎng)和代