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基于核酸适配体的功能化磁性纳米粒子的制备及其在样品前处理中的应用研究的综述报告 随着生命科学、环境科学和医学等领域的快速发展,样品前处理技术在分析,检测,诊断和治疗中的作用越来越重要。功能化磁性纳米粒子作为一种重要的样品前处理材料,因其磁性、生物相容性、表面修饰能力和操作简便等优点,已经成为研究人员进行样品分离和富集、检测等的首选材料。本文主要综述了基于核酸适配体的功能化磁性纳米粒子的制备及其在样品前处理中的应用研究。 一、核酸适配体的特性 核酸适配体是一种由单链DNA或RNA构成的序列选择器,在定义的反应缓冲液条件下,能够稳定特异性地与其特定的配对分子结合形成适应体,从而实现靶分子的富集或者定点修饰。与抗体相比,核酸适配体的优点在于靶分子的选择和修饰方便,合成和修饰成本低,生物相容性好等。这种特殊的性质赋予了核酸适配体在样品前处理中的作用。 二、基于核酸适配体的功能化磁性纳米粒子制备 1.合成方法 核酸适配体功能化的磁性纳米粒子可以通过化学合成、共价键合和静电作用等方法制备。其中,化学合成法的优点是制备简单,筛选条件易于控制,但也同时存在着高成本、高毒性等问题;共价键合法制备出来的样品具有高度的稳定性和易控性,但是合成步骤较多,操作较为复杂。当然,在不同的制备方法中,也涉及到不同的核酸适配体固定策略、表面改性方法、辅助配体等等。 2.存储 由于核酸适配体的化学性质易受到环境条件的影响而失活,因此在制备功能化磁性纳米粒子时需要考虑到核酸适配体的储存条件。常见的储存方法是以低盐缓冲液中的低温储存。对于一些易变性的核酸适配体,还可以在储存前添加保护剂,保证其充分稳定的同时,也提高了核酸适配体的修饰效率。 三、基于核酸适配体的功能化磁性纳米粒子在样品前处理中的应用 在样品前处理领域,功能化磁性纳米粒子是一种非常有前景的分离和富集物质的材料。基于核酸适配体的功能化磁性纳米粒子在样品前处理中的应用主要有以下几个方面: 1.靶分子的富集与分离 核酸适配体功能化的磁性纳米粒子可通过革兰氏染色和生物质谱技术来富集和分离肿瘤细胞、细菌、病毒、基因和蛋白质等靶分子。研究表明,在肺癌组织中AML-1和CRYAB核酸适配体功能化的超顺磁性纳米粒子的组合使用可以提高阳性检出率,并降低假阳性检出率。 2.基因分析的样品前处理 应用核酸适配体功能化的磁性纳米粒子可以快速高效地富集和分离针对靶基因的DNA和RNA序列,从而实现基因分析的目标。在一些研究中,可以通过核酸适配体与磁性纳米粒子的特异性作用,对微生物和病毒的基因进行灵敏、有效的富集和分离,提高了PCR检测的灵敏性和特异性。 3.蛋白质分析的样品前处理 核酸适配体功能化的磁性纳米粒子也可用于蛋白质分析的样品前处理。例如,通过选择性地富集靶蛋白质,并与磁性纳米粒子的相互作用,可以包括蛋白质酶解、分离等处理,进行细胞蛋白质组学研究。一些研究报道了一种基于核酸适配体功能化磁性纳米粒子对N1,N12-diacetylspermine转移酶进行富集和分离的方法,该方法可对复杂蛋白体系进行快速、准确的检测。 总之,基于核酸适配体的功能化磁性纳米粒子已经得到广泛应用并取得了许多可喜的成果,不仅为样品前处理技术的完善提供了新的思路和方向,同时也为应用研究提供了技术支持和帮助。未来随着相关技术的进一步完善和发展,相信核酸适配体功能化磁性纳米粒子在样品前处理中将会有更广泛的应用。