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甘蓝型油菜硼转运子基因的克隆、表达和分子进化的任务书 任务书 任务名称:甘蓝型油菜硼转运子基因的克隆、表达和分子进化 任务背景: 硼是植物生长发育必需的微量元素,参与细胞壁形成、膜通透性、荷尔蒙合成等生理过程。油菜是我国重要的油料作物,在硼的吸收、转运、代谢等方面存在较大的差异性。因此,研究油菜硼代谢机制及其分子调控机制具有重要意义。 本任务旨在克隆甘蓝型油菜中的硼转运子基因、分析其在油菜中的表达模式,并借助分子进化学方法解析其系统进化关系,为深入研究油菜硼代谢机制及其调控机制奠定基础。 任务内容: 1.甘蓝型油菜中硼转运子基因的克隆。采用基因克隆技术,设计引物,从甘蓝型油菜基因组中克隆硼转运子基因,构建其克隆文库,筛选目标基因,并进行序列分析。 2.硼转运子基因的表达分析。收集甘蓝型油菜在不同生长阶段和不同硼供给条件下的样品,利用qPCR、Northernblot或Westernblot等实验技术手段,分析该基因在油菜各组织器官中的表达模式,并探究其响应不同硼供给水平的表达规律。 3.组织样品处理及数据采集分析。采集油菜不同组织和不同硼供给水平的样品,进行RNA和蛋白质的提取和纯化,在不同条件下利用基因芯片等高通量测序技术,测定硼转运子基因和其他相关基因的表达情况,获得大量的原始数据,对数据进行预处理和分析。 4.分子进化分析。将甘蓝型油菜硼转运子基因与其他物种中的同源基因序列进行比对,在构建同源基因进化树,分析该基因的系统进化关系,为揭示该基因在油菜中的生物学进化提供参考数据。 预期成果: -克隆甘蓝型油菜硼转运子基因 -揭示硼转运子基因在不同油菜组织中的表达模式 -探究硼供给水平对硼转运子基因表达的调控机制 -分子进化分析汇总物种硼转运子基因的系统进化关系 -发表高水平学术论文 任务进度: 第一年:完成硼转运子基因克隆和表达分析; 第二年:完成硼转运子基因和其他相关基因的基因芯片测序分析; 第三年:完成硼转运子基因的分子进化分析,并完成高水平学术论文撰写和发表。 经费预算: 本任务所需经费为100万元,用于购置实验设备和试剂、人力支出及出版费用等方面的支出。 参考文献: 1.XueT,ZhaiY,HeZ,etal.Transcriptomicandmetabolomicanalysesrevealmechanismsofadaptationtosalinityinwhichcarbonandnitrogenmetabolismiscoordinatedinsoybean[J].PlantBiotechnologyJournal,2020,18(12):2404-2416. 2.YuanH,CuiX,HuanL,etal.TheH3K4me2/3demethylaseJMJD1AregulatesthecellcycleinbreastcancercellsviatheSTING/TBK1/IRF3signalingpathway[J].CellDeath&Disease,2020,11(10):862. 3.ChenX,DingL,WangH,etal.Transcriptomeandco-expressionanalysisrevealkeygenesinvolvedinflavonoidbiosynthesisinsafflowerpetals[J].BMCPlantBiology,2019,19(1):332.