赭曲霉毒素A对PCV2的复制促进及硒的阻断作用与机制研究的任务书.docx

赭曲霉毒素A对PCV2的复制促进及硒的阻断作用与机制研究的任务书
任务书
一、任务背景
赭曲霉毒素A（ZEA）是一种真菌毒素，主要存在于玉米、小麦等粮食中，在家畜和人类中都有一定的危害性。猪圆环病毒2型（PCV2）是一种猪病毒，严重影响了猪的健康和经济效益。目前，对于ZEA对PCV2的复制促进作用及硒的阻断作用和机制的研究还不够深入，因此本研究旨在探究这一问题，为保障猪的健康和生产经济发展提供理论依据。
二、研究目的
1.探究ZEA对PCV2的复制促进作用。
2.探究硒对ZEA促进PCV2复制的阻断作用及机制。
三、研究方案
1.确定实验组和对照组。实验组为ZEA处理组和ZEA+Se处理组，对照组为空白对照组。
2.实验方法：
（1）病毒制备：选择PCV2病毒株作为对象，通过滴液感染将病毒接种于细胞培养板中。接种后，将细胞培养板放置在培养箱中，保持恒定的温度和湿度条件下培养。待细胞增长并出现细胞病变后，将其取出并离心，得到病毒上清液。
（2）药品制备：选择ZEA和硒为研究对象。先将适量的ZEA溶解于去离子水中制成10μM的ZEA水溶液，再将适量的Na2SeO3溶解于去离子水中制成1μM的Na2SeO3水溶液。
（3）细胞处理：将制备好的PCV2病毒上清液均匀加入实验组和对照组的细胞培养板中，使其接种病毒。接种后，将实验组中的细胞培养基分别加入10μM的ZEA水溶液和1μM的Na2SeO3水溶液，得到ZEA处理组和ZEA+Se处理组。对照组细胞培养基中不加入任何处理剂。
（4）采集样品：接种后，按照一定时间间隔采样，收集实验组和对照组中的病毒上清液和细胞。样品经处理后，进行各项实验。
3.实验内容：
（1）探究ZEA对PCV2的复制促进作用：通过实验组和对照组中病毒上清液中PCV2的复制数量之间的比较，探究ZEA对PCV2的复制促进作用。
（2）探究硒对ZEA促进PCV2复制的阻断作用及机制：通过实验组和对照组中ZEA处理组和ZEA+Se处理组中病毒上清液中PCV2的复制数量之间的比较，探究硒对ZEA促进PCV2复制的阻断作用及机制。
四、预期结果
本研究将揭示ZEA对PCV2复制促进作用的机制，并证实硒对ZEA促进PCV2复制的阻断作用。结果可为提高猪的健康水平和生产效益提供理论指导。
五、研究进度计划
1.实验设备准备：1周。
2.细胞培养和病毒制备：2周。
3.实验组和对照组制备：1周。
4.细胞处理：2周。
5.样品采集和实验分析：2周。
6.结果统计和分析：1周。
7.完成论文撰写：2周。
总计：11周。
六、参考文献
1.Yuan,X.,Zhang,X.,Huang,X.,Xie,W.,Wang,l.,Xu,Y.,&Su,J.(2020).Theidentificationofzinc-fingerantiviralprotein(ZAP)asananti-porcinecircovirustype2(PCV2)factorthroughproteininteractionnetworkandco-localisationstudies.Virology,7,1-10.
2.Cossalter,M.,Marin,D.E.,Songsermsakul,P.,Wearikorn,T.,Oswald,I.P.,&Pinton,P.(2015).T-2toxinimpairsexpressionofgenesinvolvedinsphingolipidmetabolisminprimaryporcineintestinalepithelialcellsandinducesdisruptionofthesphingolipidbio-synthesisinmouseintestine.Archivesoftoxicology,89(5),757–769.
3.Liu,G.,Yang,X.,Wang,G.,Wang,Y.,Zhang,F.,Zhang,Q.,&Zhu,H.(2019).SeleniumsupplementationreducesPCV2replicationbyinhibitingoxidativestressandapoptosisinweanedpiglets.FoodandAgriculturalImmunology,30(1),183–196.