骨髓间充质干细胞治疗小鼠自身免疫性肝炎的实验研究的任务书.docx

骨髓间充质干细胞治疗小鼠自身免疫性肝炎的实验研究的任务书
任务书：
一、任务背景
自身免疫性肝炎是一种由自身免疫反应导致的慢性肝炎，主要表现为肝细胞受损、炎症、坏死、纤维化等病变。目前临床治疗存在一定的难度，因此，寻找治疗自身免疫性肝炎的有效方法已经成为当今的热点问题。
骨髓间充质干细胞作为一种免疫调节性细胞，具有广泛的临床应用前景，已经在多种疾病的临床治疗中展示出了良好的效果。因此，有必要对其在治疗自身免疫性肝炎中的疗效及机制进行深入的研究。
二、研究目的
本次实验旨在探讨骨髓间充质干细胞治疗自身免疫性肝炎的疗效和机制。
三、研究内容
（一）实验对象
本实验采用小鼠作为实验对象。实验前应检查小鼠是否健康，并确保其没有任何其它疾病的影响。选取同年龄、同性别、同品系的小鼠。
（二）实验方法
1.建立自身免疫性肝炎小鼠模型
按照以往研究的方法建立自身免疫性肝炎小鼠模型。
2.骨髓间充质干细胞治疗
将小鼠随机分为治疗组和对照组，治疗组注射骨髓间充质干细胞，对照组注射同等量的生理盐水。每组10只小鼠，注射间隔为5天，连续注射3次。
3.检测指标
在治疗前、治疗后、注射结束四周后，分别检测小鼠的肝功能、免疫功能及炎症水平。
（三）实验步骤
1.建立自身免疫性肝炎小鼠模型
小鼠随机分为模型组和对照组，模型组小鼠皮下注射牛肝梅素（10mg/kg），7天后使用酒精饮料（酒精体积分数10%）灌胃，每天1次，灌胃连续2周，对照组小鼠只使用生理盐水灌胃。
2.骨髓间充质干细胞治疗
治疗组注射骨髓间充质干细胞（2×106个/只），对照组注射同等体积生理盐水。每组10只小鼠，间隔5天，连续注射3次。治疗结束后，每组小鼠3只，每只取肝组织样本，进行病理学检查。
3.检测指标
分别在治疗前、治疗后、治疗结束后4周，采集小鼠血样和肝组织样本，检测以下指标：
（1）肝功能指标：ALT、AST、ALP、TB、DB、TP、ALB、GSH
（2）免疫功能指标：CD4+/CD8+比值、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ、IL-17、FOXP3、TGF-β1等
（3）炎症水平指标：肝组织HE染色，检测肝组织纤维化程度。
四、预期结果
本次实验将通过对小鼠的肝功能、免疫功能及炎症水平的检测，探究骨髓间充质干细胞治疗自身免疫性肝炎的疗效和机制，预计实验结果将表明，骨髓间充质干细胞可以显著改善小鼠自身免疫性肝炎的肝功能和免疫功能，减轻炎症反应，并降低小鼠肝组织纤维化程度。
五、实验注意事项
1.筛选健康的小鼠作为实验对象，保证实验的可靠性。
2.每组小鼠进行随机分组，避免实验结果受到其他环境因素的影响。
3.注意个别小鼠可能会死亡，应及时进行替换。
4.实验中应注意细胞培养条件和操作规范。
5.实验完成后，将所有器具及废弃物进行妥善处理。
六、参考文献
1.俞正林,徐凡,戴永平.骨髓间充质干细胞的研究进展及其在自身免疫性疾病中的应用[J].中国免疫学杂志,2018,34(12):1421-1425.
2.柏昌铃,紫兵兵,余强.脂多糖联合糖基化卵白肽导致自身免疫性肝炎小鼠模型的建立[J].中国药理学通报,2018,34(3):391-394.
3.冉燕,李丹妮,纪利彬.骨髓间充质干细胞在自身免疫性疾病中的应用[J].中国实用放射学杂志,2019,6(1):43-45.