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果胶低聚寡糖的酶法制备及其抑菌活性研究的任务书 一、任务背景 随着人们对健康的重视和对天然食品添加剂的需求不断增加,果胶低聚寡糖作为一种天然植物提取物,具有广泛的应用前景。它不仅可以用作食品、保健品等方面的添加剂,还具有很好的抑菌、抗癌等医疗保健功能,特别是对肠道有一定的保护作用。目前,果胶低聚寡糖已成为国内外研究的热点之一。而酶法制备的果胶低聚寡糖相比传统的酸加热方式制备的果胶低聚糖,具有环保、高效、易回收等优点,因此备受关注。 二、任务目的 本课题旨在通过酶法制备果胶低聚寡糖,并研究其在抑菌方面的应用。具体包括以下目标: 1.研究果胶低聚寡糖的酶法制备工艺:确定酶的种类、最适反应条件,探究反应过程中果胶酶的降解机制,以及研究不同工艺参数对果胶低聚寡糖产物的影响。 2.确定果胶低聚寡糖的结构特征:通过质谱、核磁共振等实验手段,分析果胶低聚寡糖的结构特征、链长及分子量等性质。 3.研究果胶低聚寡糖的抑菌活性:利用不同的抑菌实验手段,评价果胶低聚寡糖对不同草酸杆菌的抑菌活性,并探究其抑菌机理。 三、任务内容 1.果胶低聚寡糖的酶法制备 1.1果胶酶的选择,包括一般盐酸盐、清远真菌等果胶酶的优缺点比较及是否适用于低聚寡糖制备。 1.2果胶酶酶解产物的分离与纯化,包括离子交换和凝胶层析技术等。 1.3提高果胶酶稳定性及重复使用的方法研究。 1.4通过单因素实验和响应面实验等方法,探究影响果胶低聚寡糖制备的主要因素:酶浓度、底物浓度、pH、温度等工艺参数以及它们之间的交互作用,最终确定最优工艺条件。 2.果胶低聚寡糖的结构特征的研究 2.1采用红外光谱、质谱或核磁共振等技术,对果胶低聚寡糖的结构进行分析,推测其链长以及分子量。 2.2通过其他基于生化分析的方法,例如新生二糖、氨基酸等分析,进一步研究果胶低聚寡糖的结构。 3.果胶低聚寡糖的抑菌活性研究 3.1建立一套完整的果胶低聚寡糖抑菌活性评价体系:例如抑菌圈直径、最小抑菌浓度等方法。 3.2评价果胶低聚寡糖在不同草酸杆菌上的抑菌活性,研究其抑菌机理,包括确立其生物活性成分、影响生物活性的重要因素以及生物活性与结构特征之间的关系。 四、预期成果 1.稳定的果胶酶制备方法。 2.确定果胶低聚寡糖的结构特征,包括:链长、分子量、物理化学特性等。 3.研究果胶低聚寡糖的抑菌活性,并探究其抑菌机理。 4.发表学术论文或获得专利。 五、主要参考文献 1.F.Huetal.,Preparationandprebioticeffectsofpectinoligosaccharidesobtainedbydynamichigh-pressuremicrofluidizationcombinedwithenzymatichydrolysis,Carbohydr.Polym.2017,175:70-77. 2.赵幸,向磊,等.果胶降解及其酶切产物的抗癌机理研究进展.食品科学,2019,40(7):276-282. 3.R.A.Herbert,Pectinoligosaccharides:productionandphysiologicaleffects,FoodChem.2015,170:254-266.