牛卵母细胞抽提物对人肺癌细胞的表观遗传重编程作用研究的任务书.docx

牛卵母细胞抽提物对人肺癌细胞的表观遗传重编程作用研究的任务书
任务书
一、研究背景及意义
随着现代医学科技的不断发展和进步，肺癌仍然是一种全球性的重大疾病，也是世界范围内肿瘤致死率最高的癌症之一。肺癌的治疗一直是医学界的重点和难点。传统肺癌治疗往往采用化疗、放疗、手术等多种综合治疗手段，但仍存在治疗效果不佳、损伤正常组织、复发率高等问题。因此，开发治疗肺癌的新方法具有重要的临床医学意义。
表观遗传学指DNA序列不发生变化，但被化学修饰或其他因素引起基因表达水平变化的一种生物学现象。表观遗传学研究不仅有助于进一步深入了解癌症发生发展的机制，也为癌症的治疗提供了新的思路和方向。近年来，许多研究表明，牛卵母细胞抽提物对肺癌细胞的表观遗传重编程作用具有明显的抑制作用，但具体的机制和影响因素还需要进一步的研究。
本次研究的目的是，通过对牛卵母细胞抽提物对人肺癌细胞的表观遗传重编程作用进行深入研究，探究其机制和影响因素，为发掘新的肺癌治疗方法提供一定的理论和实践支持。
二、研究内容和方法
1.研究内容
（1）采用肺癌细胞株，通过MTT、流式细胞术等方法，检测牛卵母细胞抽提物对肺癌细胞生长、增殖的影响。
（2）采用IlluminaHiSeq2500高通量测序技术，分析不同浓度牛卵母细胞抽提物处理后肺癌细胞基因表达谱的变化情况，筛选并鉴定不同表达基因的差异。
（3）采用WesternBlot技术，分析牛卵母细胞抽提物对人肺癌细胞表观遗传修饰因子（如甲基化酶、去甲基化酶、组蛋白乙酰转移酶等）的表达水平的影响。
2.研究方法
（1）细胞培养和处理：选择人肺癌细胞株（如A549、H460等），采用DMEM培养基在37℃、5%CO2条件下恒温恒湿培养，在不同浓度的牛卵母细胞抽提物（如10、50、100ug/ml）处理24h，以及对照组（无处理）。
（2）细胞生长增殖检测：采用MTT法和流式细胞术，检测不同浓度牛卵母细胞抽提物对人肺癌细胞的生长、增殖情况。
（3）基因表达谱测定：采用IlluminaHiSeq2500平台进行高通量测序，分析牛卵母细胞抽提物处理后肺癌细胞基因表达谱的变化情况，并对不同表达基因的差异进行筛选和鉴定。
（4）蛋白质表达分析：采用WesternBlot技术，分析牛卵母细胞抽提物处理后人肺癌细胞表观遗传修饰因子（如甲基化酶、去甲基化酶、组蛋白乙酰转移酶等）的表达水平变化。
三、预期成果
（1）明确牛卵母细胞抽提物对人肺癌细胞的表观遗传重编程作用的影响及机制，为肺癌治疗提供新的理论和实践基础。
（2）筛选出与牛卵母细胞抽提物处理相关的差异表达基因，为后续实验提供重要参考。
（3）建立相关模型和指标体系，为深入挖掘肺癌治疗和预防的新策略提供理论基础。
四、研究计划及进度安排
（1）样本处理和细胞培养：预计2个月完成。
（2）细胞生长和增殖检测：预计1个月完成。
（3）基因表达谱测定：预计2个月完成。
（4）蛋白质表达分析：预计1个月完成。
（5）数据分析和总结：预计2个月完成。
总计：8个月。
五、主要经费预算
1.实验材料费：20000元。
2.实验设备费：无。
3.实验人员工资：20000元。
4.实验场所租金费：5000元。
5.文献资料费：3000元。
6.其它费用（如交通、通信等）：2000元。
总计：50000元。
六、参考文献
1.钟丽贞,李泓.组蛋白泛素化在肿瘤中的作用.中南大学学报:医学版,2014(6)
2.朱嘉瑞,吴国振,江继宇.表观遗传学在肿瘤治疗中的应用.中国医学影像学杂志,2016,24(10):1031-1034.
3.喻楠.DNA甲基化修饰及其与人类疾病的关系.临床医学研究与实践,2019,4(11).
4.ZengY,etal.Nuciferineinducesautophagyinhumannon-smallcelllungcancercellsviaregulatingtheAMPK/mTORpathway.DrugDesign,DevelopmentandTherapy.2019:Volume13,Pages3631-3643.