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邻苯二甲酸酯对小鼠植入前胚胎体外发育的影响及作用机制的研究的任务书 任务书 一、任务概述 随着工业化的不断发展和生产效率的提高,化学物质的使用量也不断增加。其中,邻苯二甲酸酯(DBP)作为一种广泛使用的塑化剂,在塑料、油漆、食品和药品等领域中都有应用。但是,DBP作为一种内分泌干扰物质,可能对人体健康产生不良影响。特别是在女性和儿童中,DBP可能会干扰人体激素水平,对生殖和发育产生影响。 在近年来的研究中,已经有多项研究表明,DBP可能会对小鼠植入前胚胎体外发育产生不良影响。然而,目前对于DBP对小鼠植入前胚胎体外发育的影响及其作用机制尚未有深入的了解。因此,本次研究旨在通过实验研究,探究DBP对小鼠植入前胚胎体外发育的影响及其作用机制,以期为DBP的毒性评价提供科学依据。 二、任务目标 1.研究DBP在小鼠植入前胚胎体外发育中的毒性效应。通过体外实验,观察小鼠受精卵在DBP暴露下的发育过程,并测量其细胞增殖、分化和细胞凋亡等指标。 2.探究DBP对小鼠植入前胚胎内源性激素水平的影响。通过检测小鼠植入前胚胎内雌、孕激素等激素水平的变化,分析DBP是否会影响小鼠内分泌水平。 3.分析DBP对小鼠植入前胚胎基因表达的影响。通过基因芯片技术等手段,检测DBP暴露下小鼠植入前胚胎基因表达的变化,探究DBP可能导致的基因表达调节机制。 三、任务内容 1.实验设计 (1)实验组和对照组的设定。实验组:通过给小鼠植入前胚胎的体外培养介质中添加一定浓度的DBP,暴露小鼠受精卵于DBP下。对照组:给小鼠植入前胚胎的体外培养介质中未添加DBP。 (2)测量指标的选择。包括小鼠受精卵的细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡及内源性激素水平等指标。 2.实验步骤 (1)实验材料的准备。包括小鼠受精卵、DBP和体外培养介质等。 (2)小鼠受精卵的体外培养。将小鼠受精卵移植至含有不同浓度DBP的培养介质中,利用荧光显微镜及细胞计数器等技术方法,观察小鼠受精卵发育的过程,测量其细胞增殖、分化和细胞凋亡等指标。 (3)内源性激素水平的检测。收集小鼠植入前胚胎培养上清液,利用酶联免疫吸附检测等方法,检测雌、孕激素水平的变化。 (4)基因表达的检测。采用基因芯片技术或荧光定量PCR等方法,检测小鼠植入前胚胎在DBP暴露下基因表达谱的变化。 3.数据处理和分析 (1)计算实验结果的均值和标准差。 (2)采用统计学方法,分析实验组与对照组之间指标的差异及其检验是否显著。 (3)对实验结果进行解释和分析,探索DBP对小鼠植入前胚胎体外发育的作用机制。 四、参考文献 1.BlanckHM,MarcusM,TolbertPE,etal.Ageatmenarcheandtannerstageingirlsexposedinuteroandpostnatallytopolybrominatedbiphenyl.Epidemiology,2000,11(6):641-647. 2.GuoN,ChengJ,WuT,etal.Effectofdi-n-butylphthalate(DBP)ongermcellmeiosisintheembryonictestisfromC57BL/6Jmouse.EnvironmentalToxicologyandPharmacology,2015,39(2):834-839. 3.HowdeshellKL,HotchkissAK,ThayerKA,etal.ExposuretobisphenolAadvancespuberty.Nature,1999,401(5):763-764. 4.LeeCH,KingCH,Mariño-RamírezL,etal.IncreasedprevalenceofmethylationofimprintedPEG3geneinhumantesticularspermatozoafromsubfertilemen.HumanReproduction,2008,23(7):1661-1667. 5.ZhouJ,ChenZ,XuY,etal.Di-n-butylphthalateexposuredisruptsthedevelopmentofpreimplantationembryos.ReproductiveToxicology,2020,100:112-118.