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疯草内生真菌——Undifilumoxytropis合成苦马豆素的研究的任务书 任务书 探究疯草内生真菌——Undifilumoxytropis合成苦马豆素的机制及应用 一、项目背景 苦马豆素(Swainsonine)是一种天然的生物碱,广泛分布于各种植物和真菌中,如苦马树、苦豆、天葵、苦叶等。苦马豆素具有多种药理学作用,如抗癌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、降低血糖等,因此备受关注。 疯草(Oxytropiskansuensis)是中国西北地区常见的蚜子草科植物,其含有大量的苦马豆素。研究发现,该植物中的苦马豆素主要来源于内生真菌——Undifilumoxytropis。因此,研究该内生真菌合成苦马豆素的机制,对高效、可持续地生产苦马豆素具有重要意义。 目前,已有研究发现苦马豆素的生物合成与内生真菌和寄主植物共同参与,其中内生真菌的作用尚未深入探究。因此,该项目旨在通过对疯草内生真菌——Undifilumoxytropis的研究,探究其合成苦马豆素的机理,为苦马豆素的生产提供理论和实践基础。 二、研究内容和任务 1.疯草内生真菌(Undifilumoxytropis)的分离和鉴定 (1)从疯草根际土壤中分离得到内生真菌。 (2)通过形态学和分子生物学方法对所分离的内生真菌进行鉴定,并比较不同内生真菌对苦马豆素合成的影响。 2.疯草内生真菌(Undifilumoxytropis)合成苦马豆素的基因组学和转录组学研究 (1)通过测序技术获得内生真菌的基因组和转录组数据。 (2)分析内生真菌基因组和转录组数据,鉴定参与苦马豆素合成的基因和转录组,建立内生真菌合成苦马豆素的基因调控网络。 3.疯草内生真菌(Undifilumoxytropis)合成苦马豆素的生化合成途径研究 (1)通过生化学手段分析内生真菌合成苦马豆素的生化途径,包括关键酶的鉴定和功能分析。 (2)通过基因敲除等方法验证关键酶对苦马豆素合成的影响。 4.疯草内生真菌(Undifilumoxytropis)合成苦马豆素的强化培养技术研究 (1)通过菌种筛选和培养条件优化等手段,建立内生真菌的高效培养方法。 (2)研究内生真菌产生苦马豆素的优化方式,提高苦马豆素产量。 三、预期成果 1.成功分离疯草内生真菌(Undifilumoxytropis),鉴定并比较不同内生真菌对苦马豆素合成的影响。 2.建立内生真菌合成苦马豆素的基因调控网络,鉴定苦马豆素合成的关键基因和转录组。 3.发掘内生真菌中与苦马豆素合成相关的关键酶,探究苦马豆素的生物合成途径。 4.建立内生真菌的高效培养和苦马豆素的优化生产技术,提高苦马豆素产量。 四、研究方案和时间表 1.第一年 (1)分离并鉴定疯草内生真菌,选择苦马豆素合成能力强的内生真菌,分离其基因组和转录组数据。 (2)分析内生真菌基因组和转录组数据,鉴定参与苦马豆素合成的基因和转录组。 2.第二年 (1)通过生化学手段分析内生真菌合成苦马豆素的生化途径,包括关键酶的鉴定和功能分析。 (2)通过基因敲除等方法验证关键酶对苦马豆素合成的影响。 (3)建立内生真菌的高效培养方法,初步探究优化苦马豆素产量的方式。 3.第三年 (1)深入研究内生真菌合成苦马豆素的基因调控网络,鉴定苦马豆素合成的关键基因和转录组。 (2)继续探究内生真菌产生苦马豆素的优化方式,进一步提高苦马豆素产量。 四、经费预算 本项目为三年期研究项目,总经费预算为60万元。其中: 1.耗材费用:20万元,包括分离和鉴定等实验所需的耗材、试剂、标准品等。 2.仪器设备:20万元,包括基因组测序仪、转录组测序仪、生化分离设备等。 3.人员经费:20万元,用于雇佣具有相关技术和经验的研究人员。