长链非编码RNA在胆囊癌发生发展中的作用及相关分子机制研究的任务书.docx

长链非编码RNA在胆囊癌发生发展中的作用及相关分子机制研究的任务书
任务书
一、研究背景和意义
胆囊癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，尤其在亚洲地区发病率较高。其发病机制仍不十分明确。长链非编码RNA（lncRNA）是指长度大于200个核苷酸、不能翻译成蛋白质的RNA分子，这些lncRNA在基因转录过程中发挥着利用和储存基因信息的重要作用，参与了DNA转录与表观遗传调控等许多生物学过程，尤其在一些癌症的发展、转移过程中发挥着重要作用，研究结论显示lncRNA参与了肿瘤细胞增殖、apoptosis、细胞周期启动、细胞侵袭及转移。因此，研究长链非编码RNA在胆囊癌发生发展中的作用，有助于进一步揭示胆囊癌的发病机制，有助于寻找新的治疗方法和预防策略。
二、研究内容和研究方法
1.分析不同胆囊癌患者和正常人样本中lncRNA表达谱，并确定几个高表达lncRNA，筛选出可能与胆囊癌发生发展相关的lncRNA。
2.分析本实验室先前的研究结果，确定lncRNA在胆囊癌细胞中的潜在作用。
3.研究几个特定lncRNA与胆囊癌细胞增殖、细胞周期启动、细胞侵袭及转移相关的分子机制。
4.利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，抑制几个高表达lncRNA后对胆囊癌细胞生长和增殖的影响。
5.建立胆囊癌细胞移植瘤模型或使用患者细胞，进一步分析这些lncRNA在体内的作用。
研究方法包括：实时荧光定量PCR，RNA-测序、组织免疫组化、Westernblotting、蛋白质互作双杂交（Y2H）等分子生物学技术；CRISPR/Cas9基因编辑技术；细胞生物学实验。
三、研究预期成果
1.确定几个高表达lncRNA，筛选出可能与胆囊癌发生发展相关的lncRNA。
2.揭示了lncRNA在胆囊癌细胞中的作用机制，如参与肿瘤细胞增殖、apoptosis、细胞周期启动、细胞侵袭及转移等过程。
3.研究几个特定lncRNA与胆囊癌细胞增殖、细胞周期启动、细胞侵袭及转移相关的分子机制。
4.利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，抑制几个高表达lncRNA后，研究其对胆囊癌细胞增殖和生长的影响，探索这些lncRNA是否可能成为胆囊癌的治疗靶点。
5.建立胆囊癌细胞移植瘤模型或使用患者细胞体内实验证明研究成果的相关意义。
四、研究计划和进度安排
本项研究计划为期2年，主要研究计划和进度安排如下：
第一年：
1.采集大量胆囊癌和正常人样本，分析lncRNA表达谱，并确定几个高表达lncRNA。
时间：第1-6个月。
2.分析本实验室先前的研究结果，确定胆囊癌细胞中这些lncRNA的潜在作用。
时间：第7-9个月。
3.研究几个特定lncRNA与胆囊癌细胞增殖、细胞周期启动、细胞侵袭及转移相关的分子机制。
时间：第10-12个月。
第二年：
4.设计合适的gRNA并应用CRISPR/Cas9基因编辑技术，抑制几个高表达lncRNA。
时间：第13-16个月。
5.探讨抑制几个高表达lncRNA对胆囊癌细胞生长和增殖的影响。
时间：第17-20个月。
6.建立胆囊癌细胞移植瘤模型或使用患者细胞体内实验证明研究成果的相关意义。
时间：第21-24个月。
以上为本项研究的主要计划和进度安排，可根据实验进展情况进行适当调整。
五、预算和经费来源
本项研究包括样品采集、实验材料及设备费用、劳务费等共计50万元。经费来源为课题组和科研经费。
六、研究团队和研究基地
本项研究由西安交通大学医学院胆胰外科董健教授领导，由胆胰外科、分子生物学、生物信息学等多学科专家组成的团队共同完成。研究将在西安交通大学医学院实验中心完成。
七、研究成果的推广和应用
研究成果将在SCI刊物发表，并将在学术会议上进行汇报和交流。同时，研究成果将进一步推广，为胆囊癌治疗提供新的理论基础和治疗策略。