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血浆外泌体中miRNA表达水平变化与房颤相关性的研究的任务书 任务书 一、背景 房颤是常见的心律失常之一,其主要影响心脏的收缩和舒张功能,进而影响心血管系统的代谢和康复过程。已经有研究表明,某些特定的miRNA与房颤的发病密切相关。而血浆外泌体是一种新型的信使分子,在心脑血管疾病研究中具有广阔的前景。因此,通过研究血浆外泌体中miRNA表达水平变化与房颤的关系,有助于深入了解房颤的发病机制和诊断方法,为房颤病人的治疗提供有效的参考依据。 二、研究目的 研究血浆外泌体中miRNA表达水平变化与房颤的关系,明确miRNA的差异表达情况和其作用机制,为房颤的早期诊断和治疗提供有效的理论和实践依据。 三、研究方案 1.研究对象:招募新近确诊的房颤患者50例,对照组50例。筛选满足要求的患者。 2.取样方法:采用外周静脉血采血,并对血浆进行离心处理,分离外泌体并冷冻保存。 3.RNA提取:采用标准的RNA提取方法,提取血浆外泌体中miRNA。 4.miRNA测序:采用IlluminaHiSeq2500平台对miRNA进行测序,确定miRNA的表达水平。 5.数据分析:利用生物信息学分析方法和相关软件,对测序数据进行分析,筛选出与房颤相关的差异表达miRNA。 6.数值分析:对差异表达miRNA的表达水平进行统计学分析,以确定其作用机制和生物学意义。 四、研究重点和难点 1.重点: (1)明确miRNA表达水平在房颤中的变化规律,找出与房颤相关的miRNA。 (2)探究miRNA在房颤中的作用机制和生物学意义,为房颤治疗提供有效的理论支持。 2.难点: (1)血浆外泌体中miRNA浓度较低,提取量较小,需要采用敏感的测序方法。 (2)miRNA在生物学过程中呈现复杂的相互调控网络,对研究者的综合能力和分析技巧提出了更高的要求。 五、预期成果 通过本研究,预期可以发现一批与房颤密切相关的miRNA,并阐明其作用机制和生物学意义,为房颤的早期诊断和治疗提供有效的理论和实践支持。同时,本研究还可以为血浆外泌体的研究提供新的思路和技术支持,推动心脑血管疾病的发病机制和治疗研究向更深层次和更广泛的方向拓展。 六、时间安排 本研究总计时长为24个月,具体工作安排和时间节点如下: 月份工作内容时间节点 1~6研究方案的制定和实施第1~6个月 7~12样本采集和miRNA提取第7~12个月 13~18miRNA测序和数据分析第13~18个月 19~24数据分析和成果总结第19~24个月 七、预算 本研究预算为30万元,主要包括: 1.实验材料和设备采购费用:15万元。 2.研究人员工资、交通等费用:10万元。 3.实验室租赁和管理费用:5万元。 以上预算总计为30万元。 八、参考文献 1.CassaniS,MadonnaR,DeCaterinaR.CirculatingmicroRNAsasnovelbiomarkersinatrialfibrillation:areview.JClinMed,2015,4(11):2227-2247. 2.QiuJ,ZhaoX,ZhangL.TheroleanddiagnosticvalueofcirculatingmicroRNAsinatrialfibrillationpatients.JCardiovascElectrophysiol,2018,29(8):1186-1192. 3.GidlofO,SmithJG.miRNAinatrialfibrillation:anewroleforchromatin-remodellingenzymes.CardiovascularResearch,2016,111(1):4-5. 4.ZhouB,WangS,MayrM.KISS1andatrialfibrillation:theheartandbeyond.CircRes,2017,121(11):1232-1234.