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粗毛纤孔菌总三萜的诱导合成、纯化及降血脂作用研究的任务书 任务书:粗毛纤孔菌总三萜的诱导合成、纯化及降血脂作用研究 研究背景与意义: 粗毛纤孔菌为一种拥有丰富的生物活性化合物的真菌,其中三萜类化合物被广泛研究并证实其具有降血脂、抗肿瘤等生物活性。然而,由于三萜类化合物的生物合成途径尚未完全解析,因此寻找新型三萜有机小分子化合物及探索其生物合成机制已成为研究热点。 本研究将以粗毛纤孔菌为材料,旨在诱导其三萜类化合物的合成并分离纯化目标化合物,进一步考察其对血脂水平的调节作用,为其开发新型降血脂药物提供理论依据。 研究内容: 1.粗毛纤孔菌的筛选和培养:通过对天然环境中的样品进行筛选并建立固体/液体培养体系,获得高生产三萜类化合物的菌株。 2.三萜类化合物的诱导合成:将粗毛纤孔菌进行诱导培养以增加三萜类化合物的产量。尝试不同培养条件(如不同营养成分、不同培养时间等)下的诱导效果,并通过半定量PCR技术测定各种培养条件的基因表达程度。 3.目标化合物的纯化:借助柱层析分离技术,对获得的菌株中的目标化合物进行分离纯化,得到纯化化合物,并通过NMR和质量谱分析对其结构进行鉴定。 4.降血脂作用研究:将纯化化合物应用于人和动物模型中,考察其对血脂水平和肝脏脂代谢的影响。通过检测血液中的脂质代谢参数和观察肝脏形态学变化等方法,评估该化合物的药理作用及其应用前景。 研究计划: 第一年: 1.1菌株筛选和建立固体/液体培养体系; 1.2测定菌株的生长曲线和三萜类化合物的基线含量; 1.3尝试不同培养条件下对三萜类化合物的诱导效果。 第二年: 2.1对最优培养条件下菌株的基因表达进行半定量PCR实验; 2.2对所得化合物进行NMR和质谱分析; 2.3尝试不同的柱层析分离方法并最终得到纯化大量化合物。 第三年: 3.1通过人和动物的血脂实验进行降血脂作用研究; 3.2评估该化合物的药理作用及其在降低血脂水平上的应用前景。 参考文献: 1.FengX,ZhuT,LiuY,etal.ChemicalDiversityofThreeDeep-SeaSedimentsfromtheSouthPacific.Molecules(Basel,Switzerland),2019,24(19):3484. 2.RicherJ,PandeyA,SandjoLP,etal.ThreeNewTriterpenoidsfromaMarine-DerivedStrainoftheFungusMicrodiplodiasp.MarDrugs,2018,16(9):341. 3.WangY,HuangP,HanH,etal.TheSecondaryMetabolitesandBiosynthesisGenesintheMarine-DerivedFilamentousFungiAcremoniumsp.LS9-11.MarDrugs,2017,15(9):269. 4.WuQ,XuY,QianX,etal.Induciblebiosynthesisof19-oxygenatedtriterpenoidsinanendophyticfungus,Fusariumproliferatum.Phytochemistry,2018,147:63-68. 5.ZhangW,HuangR,XiaY,etal.Cheraninone,anisoprenylatedquinone,inducesapoptosisviaincreasedROSgenerationandmitoticarrestinhumangastriccancercells.JCellMolMed,2018,22(6):3160-3171.