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我院耐亚胺培南铜绿假单胞菌临床耐药分布特点及机制研究的任务书 任务书 1.研究背景 耐亚胺培南铜绿假单胞菌(CRPA)是一种常见多重耐药的病原菌,近年来在临床上越来越常见。其中,亚胺培南是大多数肠杆菌科细菌的首选抗生素之一,但是CRPA病原体产生的亚胺培南酶(IMP)和金属β-内酰胺酶(MBL)可以破坏亚胺培南的活性,从而对抗生素产生耐药性。同时,CRPA病原体还能通过表达外泌体中的外膜囊泡(OMV)和外膜蛋白(OMP)来增强其耐药性。 因此,研究CRPA的临床耐药分布特点及机制对于制订合理的治疗方案、预防和控制病原菌的传播具有重要意义。 2.研究目的 本项目旨在: 1)了解我院CRPA的临床耐药分布特点,包括不同患者群体、不同来源、不同耐药等级和不同抗菌素耐药的分布情况。 2)探究CRPA病原菌的耐药机制,包括IMP和MBL的表达情况以及OMV和OMP的产生机制。 3.研究内容和方法 项目的研究内容分为两个部分: 3.1CRPA的临床耐药分布特点研究 1)搜集和整理我院2019年1月至2021年12月间CRPA病例的临床资料,包括患者基本信息、病情诊断、抗菌素使用情况等。 2)对搜集到的资料进行分析,以不同群体、来源、耐药等级和不同抗菌素耐药的分布情况为主要指标,利用Excel软件进行统计分析和图表绘制。 3)根据结果对CRPA的临床分布特点进行总结和分析,为制订合理的治疗方案和临床应对提供依据。 3.2CRPA的耐药机制研究 1)通过PCR方法检测CRPA中IMP和MBL的基因表达情况,探究其在耐药中的作用。 2)分离和鉴定CRPA中的OMV和OMP,分析其产生机制和对菌体耐药的影响。 3)应用SPSS软件进行统计学分析,探究IMP和MBL、OMV和OMP与CRPA耐药性的相关性。 4)根据实验结果对CRPA的耐药机制进行分析,为研究和制定针对CRPA的治疗策略提供依据。 4.研究方案 4.1样本来源 本项目样本来源于我院2019年1月至2021年12月间的CRPA病例,共计200例。 4.2研究方法 1)样本采集和处理 使用无菌采集棉签或脱脂棉球采集标本,进行细菌培养前预处理。 2)PCR检测 采用PCR方法检测CRPA病原菌中IMP和MBL的基因表达情况。 3)OMV和OMP的分离和鉴定 采用超离心法分离OMV,利用SDS-PAGE和Westernblot方法对OMV和OMP进行鉴定。 4)统计学分析 采用SPSS软件进行数据分析与统计,探究IMP和MBL、OMV和OMP与CRPA耐药性的相关性。 4.3研究成果 本项目完成后,将得到CRPA病原菌的临床耐药分布特点和耐药机制的研究结果,并在相关学术期刊上发表论文。 5.研究意义 本项目的研究结果将为制订合理的治疗方案、预防和控制CRPA病原菌的传播提供依据,为CRPA等多重耐药菌的防治工作提供帮助,具有重要的临床意义和社会意义。