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钙库调控钙离子通道特异分子的筛选及其相关特性的研究的任务书
一、研究背景与意义
钙是生命体内重要的信号分子，广泛参与生理和病理过程。钙离子通过钙离子通道进入细胞内部参与离子平衡、细胞分化、增殖、凋亡等重要生物学过程，因此钙离子通道的调控与维持细胞内钙离子浓度平衡关系着一个生命体系的健康发展。钙离子通道特异分子在调节钙离子通道活性、稳定通道结构、有选择地调控细胞内钙离子浓度等方面发挥重要作用。
因此，研究钙库调控钙离子通道特异分子的筛选及其相关特性，不仅对相关生物学、医学等学科的发展具有重要意义，而且对提高人类健康水平有着很大的潜在影响。此外，通过对钙离子通道特异分子的研究，可以为设计新型药物或疾病的诊断、治疗提供理论基础。
二、研究内容和技术路线
1.研究内容
本课题主要研究钙库调控钙离子通道特异分子的筛选及其相关特性。具体研究内容包括：
（1）钙库调控钙离子通道特异分子的筛选：通过生物信息学方法筛选潜在的钙库调控钙离子通道特异分子。
（2）钙离子通道活性的测定：采用钙离子成像或电生理学方法对钙离子通道的活性进行测定。
（3）钙库调控钙离子通道特异分子对钙离子通道活性的影响：通过上述方法评价钙库调控钙离子通道特异分子对钙离子通道活性的具体调控作用。
（4）钙库调控钙离子通道特异分子的表达与定位：采用蛋白质组学和细胞成像技术研究钙库调控钙离子通道特异分子在细胞内的表达和定位。
2.技术路线
（1）生物信息学筛选
基于现有的钙库调控钙离子通道特异分子序列信息，使用常见的生物信息学工具（如BLAST、PSI-BLAST、ClustalW等）进行多序列比对、进化树构建和同源性分析，筛选出具有潜在钙库调控功能的分子。
（2）钙离子通道活性测定
采用HEK-293细胞和钙离子成像或电生理学等技术，对钙离子通道的活性进行测定。
（3）分子生物学实验
采用PCR、Westernblotting和分子克隆等技术获取钙库调控钙离子通道特异分子的基因、蛋白表达载体等有关数据。
（4）细胞成像实验
采用共聚焦显微镜等技术研究钙库调控钙离子通道特异分子在细胞内的定位与表达情况。
三、研究计划和进度安排
（1）阶段1：文献调研和生物信息学筛选分子——3个月
负责人：研究生一名
任务：
1.1查阅相关文献，了解目前研究进展和研究热点；
1.2运用生物信息学工具筛选具有潜在的钙库调控功能的分子。
（2）阶段2：建立实验平台和对钙离子通道活性测定——6个月
负责人：研究生一名
任务：
2.1建立HEK-293的细胞培养条件和细胞转染系统；
2.2运用钙离子成像或电生理学方法对钙离子通道的活性进行测定和分析。
（3）阶段3：分子生物学实验——4个月
负责人：研究生一名
任务：
3.1采用PCR技术获得目标分子基因序列；
3.2将所得到的钙库调控钙离子通道特异分子基因插入蛋白表达载体；
3.3采用Westernblotting对重组蛋白进行检测。
（4）阶段4：细胞成像实验——3个月
负责人：研究生一名
任务：
4.1制备干细胞和半透明细胞适用的基质；
4.2采用共聚焦显微技术进行细胞成像。
（5）阶段5：撰写研究报告，论文——3个月
负责人：研究生一名
任务：
5.1撰写《钙库调控钙离子通道特异分子的筛选及其相关特性的研究》的研究报告；
5.2撰写与本课题相关的SCI论文一篇。
四、研究预期目标
本课题研究钙库调控钙离子通道特异分子的筛选及其相关特性，将阐明钙库调控钙离子通道特异分子对钙离子通道活性的调控机制，为后续的新型药物开发、疾病的诊断和治疗提供理论基础。同时，本课题研究方向新颖，预计将发表一篇SCI论文，为研究生论文的撰写提供实践机会和科研能力的培养。