银杏WRKY家族分析及响应非生物胁迫研究的任务书.docx

银杏WRKY家族分析及响应非生物胁迫研究的任务书
任务书
1.研究背景和意义
银杏是一种重要的经济林木，在我国广泛种植。然而，在自然环境中，银杏生长面临着各种非生物胁迫，如低温、干旱、盐碱等，这些环境因素的存在会给银杏的生长和发展带来很大的不利影响，甚至造成银杏的死亡。因此，在研究银杏抗非生物胁迫的机理和生物化学反应途径，对提高银杏的抗生存能力和生产力具有重要的意义。
WRKY蛋白家族是一类常见的植物转录因子，具有多种生物功能，如激素信号转导调控、植物生长与发育调节、以及响应非生物胁迫。因此，研究银杏中WRKY蛋白家族成员，在非生物胁迫下的功能调控和表达模式变化，对于进一步了解银杏的抗胁迫机制和策略具有重要的科学意义和实践价值。
2.研究目的
本研究旨在探索银杏WRKY蛋白家族成员在非生物胁迫下的表达模式变化，进一步明确其参与调控银杏对非生物胁迫响应的分子机制及生物化学反应途径，为提高银杏生产力和改善其生态环境提供科学依据。
3.研究内容
3.1WRKY蛋白家族成员的筛选和克隆
根据已知的WRKY蛋白家族保守序列，设计保守性PCR引物，从银杏基因组DNA中扩增出各类大小不同的WRKY基因脱氧核糖核酸序列，并进行测序和分析，筛选出确证的WRKY家族成员序列。
3.2银杏非生物胁迫处理
采用不同强度的低温、干旱、盐碱等非生物胁迫处理提取样本，将对照样品和非生物胁迫样品进行RNA样品的抽提和纯化，以供进一步分析。
3.3WRKY蛋白家族成员在非生物胁迫下的表达模式变化分析
通过用定量PCR方法分析在银杏不同非生物胁迫处理下WRKY成员的mRNA相对表达水平，跟踪其表达模式变化，为进一步探明银杏抗非生物胁迫机制提供基础数据。
3.4WRKY蛋白家族成员的功能分析
将选取的WRKY成员克隆至重组表达载体中，转化大肠杆菌进行表达纯化，获得纯度较高的重组蛋白，使用了蛋白小分子互作技术，通过电泳分离建立起其靶标蛋白库，进而验证其响应能力和调控活性。
4.研究保证
本研究将严格按照科学实验和操作规范进行，确保实验结果的准确性和可信度。同时，在进行实验过程中，严格遵守生物安全管理规定，保障实验过程和所涉及的生物物质在全过程中的安全性和防护性。
5.预期结果
本研究可望获得以下预期结果：
（1）筛选出银杏中的WRKY蛋白家族成员序列，建立相应的数据库。
（2）明确银杏各类WRKY成员在非生物胁迫处理下的表达模式变化。
（3）揭示银杏中WRKY蛋白家族成员在响应非生物胁迫中的功能和调控途径。
6.研究意义
本研究可为银杏抗非生物胁迫的机理和调控途径提供重要数据和基础理论支撑，为银杏的正确栽培育种、防治病虫害、提高抗逆能力等方面提供广泛的参考价值。同时，本研究所揭示的银杏对非生物胁迫的应激响应分子机制和调控途径，也将对其他植物非生物胁迫研究领域的探索和发现提供启示和借鉴。