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骨髓间充质干细胞颈内动脉移植治疗血管性痴呆大鼠的实验研究的任务书 任务书 题目:骨髓间充质干细胞颈内动脉移植治疗血管性痴呆大鼠的实验研究 一、研究背景 血管性痴呆是一种常见的老年痴呆症。其发病机制在于血管壁的退行性变化导致局部脑缺血、缺氧,最终影响脑细胞的代谢和功能。骨髓间充质干细胞(MSCs)作为一种可分化成神经元和血管内皮细胞的干细胞,引起了研究人员的广泛关注。早期的研究表明,MSCs可以通过不同的机制改善脑缺血再灌注损伤,而最近的研究发现MSCs可以降低脑缺血再灌注损伤引起的炎症反应和神经元凋亡,从而保护脑细胞功能。 针对血管性痴呆的治疗一直以来都是没有明确有效的药物治疗,因此有必要寻找其他的治疗手段。基于MSCs保护脑细胞的功能,本研究将探索颈内动脉移植MSCs治疗血管性痴呆大鼠的临床应用前景,并研究其治疗机制,为血管性痴呆治疗提供新的治疗方法。 二、研究目的 1.研究颈内动脉移植MSCs治疗血管性痴呆大鼠的可行性和安全性; 2.探究颈内动脉移植MSCs治疗血管性痴呆大鼠的疗效; 3.研究颈内动脉移植MSCs治疗血管性痴呆大鼠的机制。 三、研究方法 1.动物选取 选择40只雄性Wistar大鼠,平均体重为300g。将大鼠随机分为对照组和实验组,每个组20只。 2.建立血管性痴呆大鼠模型 将动物用50%高脂饮食喂养4周,然后取相应组的动物随机分组,颈内动脉内注射生物素和链霉素混合溶液(生物素+链霉素)并采用左颈内动脉线结扎方式建立血管性痴呆大鼠模型。 3.骨髓间充质干细胞提取 选择年轻健康的大鼠,采集其骨髓来培养MSCs;将骨髓中的单个核细胞分离出来,以DMEM/F12为基础培养基进行培养。 4.颈内动脉移植MSCs的方法 将对照组的大鼠仅注射等量PBS,实验组大鼠颈内动脉注射MSCs。MSCs使用6×10^6细胞/ml浓度,注射总量为0.15ml。 5.测量指标 ①Morris水迷宫测试: 用Morris水迷宫测试分析大鼠的认知能力和空间记忆能力;按照参考文献制定操作流程。 ②行为学评价: 采用OpenField测试评价大鼠的运动能力、情感状态、认知行为及神经行为;经过筛选合格大鼠后,4组的大鼠分别进行行为学评价 ③细胞生物学指标: 分别采集动物大鼠的颈动脉、脑组织,通过组织病理检测、酶联免疫吸附实验等方法检测血管变化和脑细胞代谢和功能的改变。 6.数据分析 SPSS22.0软件进行数据统计和分析,结果以均值±标准差(SD)表示。采用单变量分析和多变量分析等手段。 四、预期结果和意义 研究预计颈内动脉移植MSCs可以有效改善血管性痴呆大鼠的记忆和认知损伤。通过对大鼠脑血管和脑细胞的检测,可以揭示MSCs治疗血管性痴呆的作用机制,有助于为血管性痴呆的治疗提供新的思路和方法。这项研究对于提高老年痴呆症治疗水平有重要意义,也为有效防治老年痴呆症提供了新的线索。 五、研究计划 时间节点: 2019年8月1日——2020年8月1日 序号|时间节点|研究任务|任务量 1|2019年8月-2019年10月|确定实验设计,采集动物,建立大鼠血管性痴呆模型|3个月 2|2019年11月-2020年1月|提取骨髓间充质干细胞,颈动脉移植MSCs,治疗实验组大鼠|3个月 3|2020年2月-2020年4月|进行行为学评价和Morris水迷宫测试,采集大鼠颈动脉组织和脑组织|3个月 4|2020年5月-2020年6月|分析所得数据,撰写实验报告|2个月 总计|2019年8月-2020年8月||11个月 暂定经费: 骨髓间充质干细胞提取费:20000元 实验动物养殖和实验费:15000元 实验器材和试剂费:20000元 报告撰写和参会费:10000元 总经费:65000元 六、备注 本研究由XX医学院批准,严格按照动物实验伦理规范进行。研究过程中严格遵守实验要求、科学规范及安全标准。研究成果符合学术和伦理标准。