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基于组学的刀鲚群体产卵不同步分子机制研究的任务书 任务书: 一、研究背景和意义 刀鲚是一种重要的商业鱼种,其产卵期一般从11月至翌年2月,产卵时间短暂且不同鲚群体的卵泡生长和成熟度不同,因此导致不同卵泡收获期不同步。这种不同步现象容易导致水产养殖者不能充分利用刀鲚的产卵潜力,也会对刀鲚种群的稳定性和繁殖力产生影响。因此,为了解决这个问题,需要对刀鲚群体产卵不同步的分子机制进行深入探究。 二、研究内容 本研究旨在通过比较分析不同卵泡的基因表达谱、蛋白质组和代谢物组,研究不同鲚群体产卵不同步的分子机制,从而为刀鲚养殖提供相关科学依据。 具体研究内容如下: 1.采集不同鲚群体的卵泡 在刀鲚产卵期间(11月至翌年2月)采集不同鲚群体的卵泡,分别保存在离心管中,用RNAisoPlus试剂抽取RNA。 2.建立转录组文库 利用高通量RNA测序技术(RNA-seq)生成转录组文库。对转录组文库进行生物信息学分析,比较分析不同鲚群体的基因表达谱差异。 3.建立蛋白质组 对不同鲚群体的卵泡进行蛋白质组学研究,在2D-PAGE上分离蛋白质并进行比较分析,确定差异表达的蛋白质点,并进行鉴定。 4.建立代谢物组 利用液质联用技术,对不同鲚群体的卵泡进行代谢物组学研究,确定代谢物的差异表达并进行鉴定。 5.整合分析 通过整合转录组、蛋白质组和代谢物组的结果,对不同鲚群体产卵不同步的分子机制进行分析。 三、研究目标 通过比较分析不同鲚群体的基因表达谱、蛋白质组和代谢物组,揭示不同鲚群体产卵不同步的分子机制,为刀鲚养殖提供相关科学依据,使其充分利用刀鲚的产卵潜力。 四、研究方法 1.卵泡抽提和RNA提取 将采集的卵泡放入RNase-free离心管中,加入RNAisoPlus试剂,离心后收集上清提取RNA。 2.高通量RNA测序 通过高通量RNA测序确定不同鲚群体基因表达谱的差异。 3.2D-PAGE 将采集的卵泡样本进行蛋白质组分离和比较分析。 4.液态色谱-质谱联用技术 通过液质联用技术确定不同鲚群体代谢物的差异性。 5.生物信息学分析 将RNA-seq数据进行生物信息学分析,并筛选出差异表达的基因。 六、研究预期成果 通过对不同鲚群体卵泡分子机制的研究,我们期望可以得到以下成果: 1.揭示不同鲚群体产卵不同步的分子机制。 2.鉴定影响刀鲚产卵不同步的关键因素,为提高刀鲚的生产力提供科学依据。 3.提出改善刀鲚产卵不同步问题的对策和建议。 七、参考文献 1.YuM,etal.(2018)transcriptomicprofilinganalysisofovarydevelopmentinmystuscavasiusthroughRna-seq.Gene663:154-161. 2.JiaQ,etal.(2019)Comparativeproteomicsanalysisofpreovulatoryovarianfolliclesshedsnewinsightintomoleculareventsinovulationincattle.BMCGenomics20:143. 3.FangL,etal.(2019)Metaboliteprofilinganalysisofmarinemedaka(oryziasmelastigma)ovarybyultra-high-performanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry.EcotoxicologyandEnvironmentalSafety183:109547.