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槲皮素对巨噬细胞泡沫化的影响及其机制的研究的任务书
一、研究背景与意义
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是一种以动脉内皮细胞（endothelialcell，EC）损伤、血管壁胆固醇沉积、巨噬细胞泡沫化和斑块形成为特征的慢性炎症疾病。巨噬细胞泡沫化是AS病程中的关键步骤，它是由于外周血中低密度脂蛋白（low-densitylipoprotein，LDL）在内皮细胞中被氧化后，被巨噬细胞摄取并代谢形成胆固醇酯而导致的。泡沫细胞破裂和凋亡可以引起斑块的稳定性降低和破裂，加速AS的进展。目前，AS的治疗方法十分有限，因此，深入研究巨噬细胞泡沫化的机制，开发治疗AS的新药物具有重要意义。
槲皮素（quercetin）是一种广泛存在于自然界中的黄酮类化合物，在饮食中槲皮素也是常见的营养素之一，它有抗氧化、抗癌、抗炎等多种生物学效应。研究发现，槲皮素可以通过调控多个信号通路抑制巨噬细胞的活化和炎症反应，因此，槲皮素在治疗肿瘤、心血管疾病等方面具有很好的应用前景。
二、研究内容和方法
本研究的主要内容是探究槲皮素对巨噬细胞泡沫化的影响及其机制，具体研究内容如下：
1.建立巨噬细胞泡沫化的模型
选择小鼠RAW264.7巨噬细胞作为研究对象，通过体外培养的方式将巨噬细胞诱导泡沫化，诱导方法为将巨噬细胞处理10ug/mL氧化的LDL24小时。采用油红O染色法检测巨噬细胞内胆固醇酯含量。该模型的建立是后续研究的前提。
2.观察槲皮素对泡沫细胞的影响
在建立的泡沫化模型中加入槲皮素，观察不同浓度的槲皮素对泡沫细胞形成的影响，并使用油红O染色法检测泡沫细胞内胆固醇酯含量。
3.探究槲皮素的作用机制
（1）观察槲皮素对氧化LDL摄取的影响；
（2）检测槲皮素对巨噬细胞凋亡的影响；
（3）检测槲皮素对NF-κB信号通路的影响。
4.确定槲皮素的治疗效果
使用槲皮素处理泡沫细胞后，检测其对细胞凋亡和斑块的稳定性的影响。同时，采用小鼠缩窄性动脉病变模型，观察槲皮素的治疗效果。
三、研究进度和时间安排
本研究计划为期1.5年，预计完成时间为2023年12月。
第一年：
前期准备（2个月），包括文献调研、实验室装修、试剂和仪器设备的采购等。
建立RAW264.7巨噬细胞泡沫化模型，并确定不同浓度槲皮素对泡沫细胞形成的影响（4个月）。
第二年：
检测槲皮素对氧化LDL摄取、巨噬细胞凋亡以及NF-κB信号通路的影响（6个月）。
确定槲皮素的治疗效果，并进行小鼠缩窄性动脉病变模型实验，观察槲皮素的治疗效果（4个月）。
四、预期成果
本研究将探究槲皮素对巨噬细胞泡沫化的影响及其机制，为AS的治疗提供了新的思路。预计有以下几点成果：
1.建立小鼠巨噬细胞泡沫化的模型，并确定不同浓度槲皮素对泡沫细胞形成的影响。
2.探究槲皮素对氧化LDL的摄取、巨噬细胞凋亡以及NF-κB信号通路的影响。
3.确定槲皮素对AS的治疗效果，并证实其在小鼠缩窄性动脉病变模型中的治疗效果。
4.发表论文2-3篇，其中至少1篇发表在SCI收录的国际权威期刊上。
五、参考文献
1.Li,C.,Yang,M.,Li,Z.,&Zhang,Y.(2017).QuercetinattenuatestheactivationofhepaticstellatecellsandliverfibrosisinmicethroughmodulationofHMGB1-TLR2/4-NF-κBsignalingpathways.ToxicologyandAppliedPharmacology,329,1-10.
2.Cao,J.,Wei,Y.,Lian,J.,&Huang,X.(2020).Quercetininhibitstheactivationoftoll-likereceptor4inmurinemacrophagesstimulatedbyoxidizedlow-densitylipoprotein.TheJournalofNutritionalBiochemistry,83,108444.
3.Guo,X.,Li,Y.,Sun,X.,Gao,J.,Zhao,Y.,&Gong,W.(2021).QuercetininhibitsmacrophagefoamcellformationandregulatescholesteroleffluxthroughtheAMPK/SREBP-2pathway.JournalofAgriculturalandFoodChemistry,69(6),1839-1848.