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氯氰菊酯降解菌的筛选、降解条件优化及其酶纯化研究的任务书 任务书 一、选题背景和意义 氯氰菊酯是一种常用的杀虫剂,经常被应用于水果、蔬菜和花卉的种植和保护中,但同时也会对人体健康以及环境造成一定的危害。因此对氯氰菊酯进行降解处理,是维护人类健康和环境保护的必要手段之一。其中微生物降解是一种环保、高效的降解方式。 本课题旨在筛选氯氰菊酯降解菌、优化降解条件、提高降解效率并进行酶纯化研究,以期为氯氰菊酯的降解提供新的思路和技术手段,同时也为其他农药类物质的降解研究提供参考。 二、研究内容和拟定方法 1.筛选氯氰菊酯降解菌 通过不同样品的富集培养和分离,筛选出具有降解能力的菌株。初步判断其降解能力,并通过16SrRNA序列分析鉴定其分类位置。 2.降解条件的优化 选择较好的降解菌株,确定菌株最适生长条件和最适降解条件。探究pH值、温度、C/N比等因素对降解率的影响,通过响应面分析(RSM)法进行拟合和优化,确定最佳的降解条件。 3.提高降解效率的研究 通过外源添加较佳碳源、氮源及微量元素等对菌株进行培养,研究对降解率提高的促进作用。也可以通过菌株的适应性和耐受性对菌株进行了解,等提高菌株降解能力的实验。 4.酶纯化研究 研究菌株的细胞内酶,通过分离纯化、酶动力学性质及SDS-PAGE等技术来研究菌株氯氰菊酯降解酶的特性。 三、预期研究结果 本课题的预期研究结果有: 1.筛选出具有较高降解能力的细菌,并鉴定其分类位置和演化关系。 2.优化氯氰菊酯降解条件,提高降解率。 3.探究影响氯氰菊酯降解效率的因素,并试图延长裂解过程。 4.进一步研究氯氰菊酯降解酶的性质,为应用降解酶提供基础科学数据。 四、研究内容的关键性和难点 1.筛选出具有降解能力的菌株并鉴定其分类位置。 2.找到氯氰菊酯的最适降解条件并提高降解率,包括对菌株的适应性和耐受性的研究。 3.研究氯氰菊酯降解酶的特性并进行酶纯化。 五、参考文献 1.ZhengWL,FengHY,HuangJG,WeiP,LuoXD,ChenML(2012).Studyondynamicsandmechanismoffipronildegradationwithmixedmicroorganisms.AfricanJournalofMicrobiologyResearch,6(5):1023-1028. 2.KabirMM,AhmedMB,KimGB,KwonJH(2018).Insightsintoabioticandbioticdegradationoftheorganophosphoruspesticides:Acriticalreview.EcotoxicologyandEnvironmentalSafety,161:118-128. 3.ZouS,LiY,YanL,ZhangZ,LiH,ZhangG(2019).AerobicbiodegradationoforganophosphatepesticidechlorpyrifosbyanovelstrainAlishewanellasp.BJ-Y. 4.WangP,LiJ,LiuCY,WangJJ,YangC,LüYB,LiYC(2019).MetabolicanalysisofcarbofurandegradationbyBacillussp.YP1-1.PesticideBiochemistryandPhysiology,159:46-53. 6.ChenY,XuR,LiY,LiuG(2017).BiodegradationoffenvaleratebyanewlyisolatedbacteriaAcinetobactersp.YW-10.EnvironmentalScienceandPollutionResearch,24(35):27307-27314.