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FAM83D促进非小细胞肺癌细胞上皮间质转化及侵袭迁移的作用研究的任务书 任务书 一、选题背景和意义 非小细胞肺癌(NSCLC)是一种常见的恶性肿瘤,其占据了肺癌的大部分病例。尽管现在的诊断和治疗方法不断地得到更新和改进,但是NSCLC的患病率和死亡率仍然居高不下。因此,开展NSCLC的相关研究具有重大的意义。 前人的研究表明,FAM83D基因在NSCLC中的表达水平明显升高,可以促进NSCLC细胞的增殖和侵袭。而上皮-间质转化(EMT)是一种紧密联系的现象,其与肿瘤的侵袭保持密切相关。因此,初步分析认为,FAM83D可以通过调控NSCLC细胞的EMT过程,从而促进其侵袭和迁移。 因此,本研究旨在探究FAM83D在NSCLC中的表达及其在EMT过程中的作用,进一步分析其对NSCLC细胞的侵袭和迁移的影响,为NSCLC的相关研究提供理论依据。 二、研究方法和流程 2.1原料和试剂 1.NSCLC细胞 2.原装荧光显微镜 3.贴壁细胞培养基 4.0.25%胰酶液 5.1×PBS 6.0.25%胰酶/EDTA溶液 7.FAM83DsiRNA 8.细胞增殖检测试剂盒 9.Transwell细胞迁移试验 10.Scratchwoundhealingassay 11.Westernblotting测定 2.2研究流程 1.生长曲线分析:选择适当的培养条件,通过细胞增殖试验确定细胞的生长曲线。 2.FAM83DsiRNA干扰实验:利用FAM83DsiRNA进行干扰实验,验证FAM83D基因对NSCLC细胞的表达及其作用。 3.细胞迁移实验:采用Transwell细胞迁移试验和划痕愈合实验,探究FAM83D在NSCLC细胞侵袭和迁移中的作用。 4.Westernblot分析:收集实验数据,通过Westernblot分析探究FAM83D对NSCLC细胞EMT过程的影响。 2.3预期结果 1.生长曲线分析表明选用的培养条件确切可行,数据准确。 2.FAM83DsiRNA干扰实验结果显示,采用FAM83DsiRNA对NSCLC细胞进行干扰,成功抑制了FAM83D的表达水平。 3.利用Transwell细胞迁移试验和划痕愈合实验,得出FAM83D在NSCLC细胞侵袭和迁移中作用的研究结果,以及部分明确的依据。 4.通过Westernblot分析,揭示FAM83D对NSCLC细胞EMT过程的影响,推测FAM83D可以通过调节膜蛋白的表达,从而影响NSCLC细胞EMT过程。 三、预期成果 1.揭示FAM83D基因在NSCLC中的表达及作用机制。 2.确认FAM83D调节NSCLC细胞EMT过程的作用路径。 3.为NSCLC的相关研究提供新的可能性。 四、研究计划 1.在日常实验前,需进行充分的文献调研,掌握FAM83D基因及其在NSCLC中的相关信息。 2.采用先前确定的生长条件,进行细胞增殖和FAM83DsiRNA干扰实验,合理控制各项指标,以保证数据的有效性。 3.利用Transwell细胞迁移试验和划痕愈合实验,得出FAM83D在NSCLC细胞侵袭和迁移中作用的研究结果,以及部分明确的依据。 4.通过Westernblot分析,揭示FAM83D对NSCLC细胞EMT过程的影响,推测FAM83D可以通过调节膜蛋白的表达,从而影响NSCLC细胞EMT过程。 5.综合实验结果,进一步探究FAM83D及其所在通路在NSCLC中的作用原理和作用机制。 6.撰写科研论文,导师修改,答辩,校外发表,完善个人实验能力,扩展相关的学术视角,提升科学素养。 五、参考文献 1.Costa,R.,etal.(2017)'FAM83familyoncogenesarebroadlyinvolvedinhumancancers:anintegrativemulti-omicsapproach',MolecularOncology,11(2),pp.167-179. 2.Kim,Y.H.,etal.(2015)'FAM83Dpromotescellproliferationandinvasionthroughregulationofcytoskeletalrearrangementsinglioma',Oncotarget,6(21),pp.18145-18159. 3.Zheng,S.,etal.(2018)'HighexpressionofFAM83Dassociateswithprogressionandpoorprognosisinhepatocellularcarcinoma',BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications,498(4),pp.939-945. 4.Yu,W.,etal.(2018)'FAM83Dkno