糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞体外培养的实验研究的任务书.docx

糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞体外培养的实验研究的任务书
一、研究背景
糖尿病是一种常见的慢性疾病，对世界各国人民的健康产生了巨大影响。糖尿病的并发症如神经病变、视网膜病变、肾脏病变等严重影响着患者的生活质量。目前，糖尿病治疗的主要方法为胰岛素替代治疗、口服降糖药等，但难以根治疾病并且会产生副作用。因此，寻找适宜而安全的治疗方法势在必行。
骨髓内皮祖细胞（EndothelialProgenitorCells，EPCs）具有修复创伤组织和血管生成的能力。EPCs的生长、分化和迁移均受多种因素的调控，其中包括各种生长因子、化学物质、蛋白质以及细胞外基质成分。目前，已有研究表明，EPCs有望成为糖尿病治疗的新途径之一。但是，糖尿病病理状态下，EPCs的数量和功能明显受损。
因此，在本次实验中，我们将研究糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞体外培养等相关问题，以期探索新的糖尿病治疗方法。
二、研究目的
1.通过体外培养的方法，寻找适宜的培养环境，维持糖尿病大鼠内皮祖细胞的良好生长状态。
2.通过测定内皮祖细胞的活性、增殖、迁移等生理指标，探索糖尿病大鼠内皮祖细胞的功能状况。
3.通过对内皮祖细胞表面受体的分析，探究糖尿病大鼠内皮祖细胞的表达差异，为其功能研究提供理论支持。
三、研究方法
1.大鼠骨髓内皮祖细胞的提取
选取糖尿病和正常大鼠10只，分别在股骨头和胫骨处以及联合部位抽取骨髓。在加入抗凝剂前，用PBS润洗骨髓，将骨髓挤出，离心后利用差速离心法，分离出高密度细胞，从而提取内皮祖细胞。
2.内皮祖细胞的体外培养
将提取出的内皮祖细胞进行体外培养，评估各种培养环境对内皮祖细胞的影响，比较各种培养环境下内皮祖细胞的活性、增殖情况等生理指标。
3.内皮祖细胞功能测试
应用荧光染色法、划痕愈合法和Transwell迁移法等，评估内皮祖细胞的活性、增殖和迁移等生理指标。
4.内皮祖细胞表面受体的分析
借助流式细胞术技术，对内皮祖细胞表面的受体进行研究，比较糖尿病大鼠内皮祖细胞与正常大鼠内皮祖细胞的表达差异。
四、研究预期结果
1.通过体外培养实验，找到适合糖尿病大鼠内皮祖细胞生长、分化和迁移的培养条件，提高内皮祖细胞的生长能力和存活率。
2.研究糖尿病大鼠内皮祖细胞的功能状态，在生理指标的差异性中提取其特点，为糖尿病治疗方法的探索及相关理论支持提供更多思路。
3.发现糖尿病大鼠内皮祖细胞表面受体的表达差异，为糖尿病治疗提供更加详细的基础数据支持。
五、研究意义
本次实验研究糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞的体外培养，是为了探索新的糖尿病治疗方法，其意义如下：
1.对日后糖尿病治疗的发展起到了探索性作用，为糖尿病治疗提供更加丰富的内容。
2.为未来的糖尿病治疗提供了理论和实践依据。