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DDT降解细菌KK的分离鉴定及其降解特性研究的任务书 任务书 课题名称:DDT降解细菌KK的分离鉴定及其降解特性研究 一、研究背景 DDT是一种常用的杀虫剂,由于其在土壤中具有长期的残留性、毒性大、对环境的危害和污染极为严重,已经被列为世界禁用杀虫剂之一。由于DDT环境持久性的问题,对DDT及其衍生物进行降解处理已经成为重要的环境治理手段之一。在DDT环境治理过程中,DDT降解细菌的生物技术在理论和实践上已被证明是最有前途的处理方法之一。因此,分离鉴定DDT降解细菌的研究具有很高的研究价值和推广应用前景。 二、研究目的 本研究的主要目的是通过土壤微生物的筛选和鉴定,获得DDT高效降解菌株,对其降解DDT的能力和降解特性进行分析和研究。 三、研究内容与方法 (一)菌群的筛选 1.1采集DDT污染土样进行筛选 选取DDT含量高的土壤样品作为材料,进行筛选。 1.2用最近发方法,如代谢文化、限制性地质分析等方法进行筛选 根据DDT的结构及其降解代谢,通过等电点电渗析、压力细胞、大肠杆菌响应蛋白等筛选方法,获得DDT高效降解菌株。 1.3筛选菌株的生长和降解特性检测 利用液体和平板培养基,针对筛选出的菌株进行生长和降解特性检测。 (二)高效降解菌株的鉴定 2.1分离菌株 用常规方法分离肠道菌群或用改进筛选技术筛选优异孤儿菌株。 2.2形态学鉴定 通过湿式学、生化特性分析等方法对分离出的菌株的形态学特征进行鉴定。 2.3分子生物学检测 通过PCR扩增菌株的16SrRNA基因、14SrRNA基因等进行菌株分类和鉴定。 2.4抗菌药物敏感性试验 通过药敏试验,确定菌株对抗菌药物的敏感性和抗药性。 (三)菌株的DDT降解特性研究 3.1降解率测试 通过液相色谱法检测DDT的降解率。 3.2降解途径分析 通过检测代谢产物、降解酶活性变化等方法,分析DDT的降解途径。 3.3影响降解的因素分析 通过温度、pH、碳源等条件变化,研究菌株对DDT降解的影响以及其适应环境的能力。 四、研究成果 4.1分离鉴定出具有较高DDT降解率和稳定性的菌株 4.2研究了DDT高效降解菌株的生长和降解特性 4.3发现并研究了菌株对DDT的降解途径及影响因素 五、拟定进度计划 五个月完成。 其中第一月份进行DDT污染土样的选择和筛选方法的选择以及菌群生长和降解特性的检测。 第二个月进行菌株的分离和形态、生物学的鉴定。 第三个月进行菌株的分子生物学检测及抗菌药物敏感性试验。 第四个月进行菌株的DDT降解率测试及途径分析。 第五个月进行菌株影响降解因素分析以及最终稿整合。 六、参考文献 [1]林播,桂和珍.微生物降解DDT的研究进展.食品与发酵工业,2017,43(22):270-276. [2]AglerMT,WrennBA,ZinderSH,etal.Effectofdechlorinationrateonbacterialcommunitystructureinasedimentmicrocosm.ApplEnvironMicrobiol,2012,78(8):2738-2743. [3]徐宏,史磊磊.一株具有高效降解DDT能力的细菌的分离和鉴定.环境科学,2019,35(5):2192-2198.