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比较TALEN技术与ZFN技术
重组锌指核酸酶（zinc—fingernucleases，ZFN）技术与转录激活因子样效应蛋白核酸酶（transcriptionactivator—likeeffectornucleases，TALEN）技术是可以对基因组进行定点修饰的基因编辑技术，可精确地定位到基因组的某一位点上并剪断靶标DNA片段从而插入新的基因片段，从而对原基因组进行“编辑”。
ZFN技术依赖于特异性识别并结合DNA的锌指蛋白和FokI核酸内切酶可剪切结构域组成的融合蛋白,可切割特异DNA序列并引起DNA双链断裂（double-strandbreaks，DSB）,DSB激活细胞的DNA修复机制，从而定点修饰基因组。TALEN是由转录激活因子样效应物（TALE)代替ZF与FokI核酸内切割域组成的基因编辑工具.
一、结构与原理
ZFN技术中,锌指结构域通常由3—6Cys2-His2型锌指单元串联而成，他们借助一个Zn2+形成ββα构象，其中α螺旋中的-1，+3，+6位的三个氨基酸直接与靶DNA的三联碱基相互作用.这三个残基中的任一残基的改变都会影响ZF对目标碱基的识别。根据目的基因设计8-10个锌指结构域并与FokI结合可构成靶向特定位点的ZFNs,在FokI切割域的二聚化作用下完成对目的基因的编辑。
TALE蛋白包括三部分：N端序列、C端序列、由高度保守的重复单元组成的中心重复区。每个重复单元中除12、13位氨基酸可变外其余几乎相同，12、13位的两个氨基酸被称为重复可变的双氨基酸残基（repeatvaribledi-residues，RVDs）。RVD与A、T、C、G之间有着严格的对应关系，即NI-A;NG-T;HD-C；NN—G。构建TALE时，根据靶DNA序列变换RVDs并串联重复单元并与FokI切割结构域结合,TALE与靶位点结合,二聚化的FokI对其进行切割,完成基因编辑操作.
二、ZFN、TALEN异同点比较
与ZFN相比，TALEN的优势是十分明显的。第一，TALEN简化了ZFN复杂的筛选过程，在简单的分子克隆条件下就可构建出高效的TALEN；第二，TALEN结合DNA序列更为严格，打靶效率高于ZFN;第三，TALEN降低了脱靶的可能性，从而降低了对受体细胞的毒性。详细比较如下：
2.1共同点
二者均为人工改造的核酸内切酶，由特异性识别靶DNA的识别域和非特异性剪切dsDNA的切割域,他们配合着行使功能,缺一不可.
ZFN、TALEN中的FokI是源于黄单胞杆菌的一种限制性核酸内切酶，它只有形成二聚体时才对dsDNA具有剪切活性。
FokI切割DNA后的修复机制相同：在两个靶位点之间剪切DNA，在DSB处诱发DNA的同源重组修复机制和非同源末端连接修复机制，从而达到定点修饰。
2。2不同点
开发时间:最早的ZFN出现在18年前，而TALEN技术才于2007年问世。
靶DNA序列的识别：ZF结构域识别的是三联碱基,而TALEN结构域识别的是某特定的核苷酸。例如：某蛋白包括两个锌指结构域，可识别六个碱基;而当它包括两个TALEN结构域时即两个RVD，仅能识别两个碱基。此外,TALEN的RVD与碱基之间的对应关系与物种、细胞、DNA序列无关，并且设计简单,成本低，与ZFN相比活性更高。
上下文依赖效应：ZFN在识别DNA序列时，重复氨基酸之间会产生相互作用，也就是上下文依赖效应，从而使得识别的特异性发生了改变，影响基因修饰效率。还未见TALEN上下文依赖效应的相关报道.
对细胞的毒性效应：锌指酶切割DNA时易产生脱靶现象，对细胞产生了毒副作用。TALEN脱靶情况较少，毒性小。例如：通过点对点地比较二者对人细胞内源基因CCR5的删除效果，发现在效率大体相同的情况下，目前实验数据显示TALE所产生的细胞毒性比ZFN小得多。
靶向基因序列长度:与ZFN相比，TALEN可以识别更长的靶基因序列。
三、存在的问题与展望
目前，ZFN技术还存在以下困惑：锌指蛋白结构域与DNA结合的特异性、亲和性有待提高；如何让解决ZFN的高效导入、可调控切、瞬时表达问题；ZFN对细胞的潜在综合作用需进行综合评价，并对引起的潜在免疫反应，尤其是针对于源于细菌的FokI结构域的客观评价。
同样地,TALEN技术还存在以下问题：设计识别20个碱基含有1000多个氨基酸的TALEN蛋白，会引起机体的免疫应答，降低了其在细胞中的打靶效率；TALEN同样会产生脱靶的现象，可能由于细胞中染色体的状态引起，如TALEN技术对于异染色质化的基因无效；TALEN技术的应用主要集中在基因敲除方面，但是否适合大片段基因的插入尚不明确。
ZFN、TALEN技术为人们定向改造基因提供了基础，但相关应用还处于初级阶段，但他们在转基因动、植物的研究方面尤其是TA