呼吸氢气对实验性自身免疫性脑脊髓炎的保护作用和机制研究的开题报告.docx

呼吸氢气对实验性自身免疫性脑脊髓炎的保护作用和机制研究的开题报告
一、研究背景和意义
自身免疫性脑脊髓炎（transversemyelitis，TM）是一种自身免疫性疾病，主要特征是脊髓中段的炎性损害，导致感觉、运动和自主神经功能异常，病情严重时可导致瘫痪和呼吸困难等严重后果。目前病因未明，临床治疗主要以控制炎症反应和神经功能支持为主，疗效欠佳。因此，寻找对TM具有保护作用的新的治疗方法具有重要的临床意义。
氢气作为一种具有广泛应用前景的保护性气体，已被证实可以通过减轻氧化应激、抑制炎症反应和减少细胞凋亡等多种机制保护各种器官和组织。在神经系统疾病治疗中，氢气也显示出了一定的应用前景。但是，对于氢气在TM治疗中的作用和机制研究还很有限。
因此，本研究旨在探讨呼吸氢气对实验性自身免疫性脑脊髓炎的保护作用和机制，寻找新的治疗方法和理论基础，为TM的临床治疗提供参考。
二、研究内容和方法
（一）研究内容
本研究将采用MOG35-55诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型，观察呼吸不同浓度氢气对疾病进展和神经功能的影响，并探讨其可能的机制。
具体内容包括：
1.建立MOG35-55诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎模型。
2.实验分组：将小鼠随机分为对照组、氢气处理组和氧气处理组，在模型诱导前30分钟开始呼吸不同浓度氢气或氧气。
3.观察氢气对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的病情进展、炎症反应、神经功能和细胞凋亡的影响。
4.采用免疫组化、ELISA、RT-PCR等技术，探讨氢气对病理过程、炎症反应和神经保护机制的影响和作用途径。
（二）研究方法
1.实验动物：C57BL/6小鼠，雌雄不限，6周龄。
2.实验药物和气体：MOG35-55多抗原肽、氢气、氧气。
3.建立MOG35-55诱导的自身免疫性脑脊髓炎模型：首先准备MOG35-55多抗原肽，将之溶解至PBS中制成50ug/50ul的MOG35-55/PBS混合溶液。小鼠背脊部皮肤消毒后穿刺注射，3次，每次50ug。完全创伤后，再于针尖处注射完全弗氏佐剂50ul。氢气和氧气组按照模型诱导前30分钟开始呼吸氢气或氧气（流量2L/min，1小时）。
4.评估指标：记录小鼠体重变化、症状分数、炎性细胞浸润情况、炎症因子水平及细胞凋亡情况。采用行为学实验对神经功能进行评价。采用免疫组化、ELISA、RT-PCR检测相关细胞和因子的表达情况。
三、预期成果和意义
本研究预期得出认为：
1.氢气处理组小鼠病情较对照组和氧气处理组小鼠病程明显缓解。
2.氢气处理组小鼠脊髓病灶处炎症细胞浸润和炎症因子水平明显降低，神经功能明显改善。
3.氢气通过抑制氧化应激、减轻免疫细胞浸润和细胞凋亡等多种途径发挥对TM的神经保护作用。
本研究的意义在于：
1.研究氢气对实验性自身免疫性脑脊髓炎的保护作用和机制，为TM治疗提供新的理论基础和方法。
2.对氢气的神经保护机制进行探讨，有助于深入理解氢气在神经系统疾病治疗中的作用。
3.为进一步开展氢气在临床治疗TM的研究提供参考和依据。