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脊尾白虾CRISPRCas9基因编辑系统的建立及铁蛋白的功能分析的任务书
任务书
任务名称：脊尾白虾CRISPRCas9基因编辑系统的建立及铁蛋白的功能分析
任务背景：脊尾白虾是一种重要的经济性海水养殖动物，其生长和免疫机制一直是研究的热点和难点。铁是生命活动必需的重要元素，铁蛋白是动物体内重要的铁存储和运输蛋白质，具有重要的生理作用。近年来研究发现，铁蛋白的表达与脊尾白虾的免疫系统密切相关，但铁蛋白在脊尾白虾免疫中的具体作用机制及其相关基因的调控机制仍未明确。因此，建立脊尾白虾CRISPRCas9基因编辑系统，对铁蛋白进行系统化的功能分析，可以为脊尾白虾免疫系统的研究提供重要的理论和实践基础。
任务目标：本任务旨在建立脊尾白虾CRISPRCas9基因编辑系统，针对铁蛋白基因进行系统性的功能分析，发掘其在脊尾白虾免疫系统中的作用机制，并为脊尾白虾的研究提供新的思路与方法。
任务内容：
1.建立脊尾白虾CRISPRCas9基因编辑系统
1.1、构建puc19-Cas9载体，并完成其序列鉴定
1.2、筛选sgRNA靶点，合成sgRNA
1.3、构建sgRNA表达载体
1.4、检测Cas9-sgRNA系统的基因编辑效率
2.功能分析铁蛋白的生理作用
2.1、克隆分离脊尾白虾铁蛋白基因，构建RNAi克隆表达载体
2.2、通过RNAi技术沉默铁蛋白基因
2.3、对沉默前后的脊尾白虾进行生化、免疫学及分子学等方面的分析
3.研究铁蛋白在脊尾白虾免疫中的作用机制
3.1、建立脊尾白虾免疫相关基因的数据库，分析铁蛋白在脊尾白虾免疫网络中的位置和拓扑关系
3.2、分析铁蛋白在脊尾白虾免疫中的调控机制
3.3、分析铁蛋白在脊尾白虾免疫中的信号通路，寻找关键环节
任务进度：
第1-4个月：
构建Cas9表达质粒，鉴定质粒
筛选适合的sgRNA靶点，合成sgRNA
构建sgRNA表达载体
检测Cas9-sgRNA系统的基因编辑效率
分离铁蛋白基因并建立RNAi表达载体
第5-8个月：
RNAi技术沉默脊尾白虾铁蛋白基因
对沉默前后的脊尾白虾进行生化、免疫学及分子学等方面的分析
建立脊尾白虾免疫相关基因的数据库，分析铁蛋白在脊尾白虾免疫网络中的位置和拓扑关系
分析铁蛋白在脊尾白虾免疫中的调控机制
第9-12个月：
分析铁蛋白在脊尾白虾免疫中的信号通路，寻找关键环节
总结分析铁蛋白功能及其在脊尾白虾免疫中的作用机制
编写研究报告，完成论文撰写
任务组成员：
组长：XXX
组员：XXX、XXX、XXX
任务经费：
本任务经费为XXX元，其中用于试剂和仪器设备的经费为XXX元，人员开支预计为XXX元，其余经费为差旅费、交流费等。
参考文献：
1.Zhuetal.(2017)Interactionsbetweenironmetabolismandtheimmunesysteminosteoporosis.ImmunolRes.
2.Wangetal.(2015)Theroleofironmetabolismincancertherapy:exacerbatingthecancer-promotingeffectsofradiotherapyandchemotherapy.FrontOncol.
3.Lietal.(2016)Regulationofironhomeostasisbythep53-ISCUpathway.SciAdv.
4.Yuetal.(2018)Ironmetabolicreprogramminginmacrophagesisessentialfortuberculosiscontrol.EMBOJ.
5.Wangetal.(2019)Ironmetabolismincancer.IntJMolSci.