结扎肠系膜淋巴管对失血性休克大鼠肺组织基因表达谱的影响的任务书.docx

结扎肠系膜淋巴管对失血性休克大鼠肺组织基因表达谱的影响的任务书
任务书
题目：结扎肠系膜淋巴管对失血性休克大鼠肺组织基因表达谱的影响
背景和意义：
结扎肠系膜淋巴管（CMVL）已被证明是一种治疗急性肠系膜淋巴排出障碍病变的有效方法。然而，它的影响仍然是多方面的。近年来，越来越多的研究表明失血性休克（HS）患者常常出现肺部组织学和病理生理学变化。但结扎CMVL是否影响HS大鼠肺组织的基因表达谱仍有待探究。本次实验将分析HS大鼠肺部基因表达谱，比较结扎CMVL前后的差异，以期深入探究这种方法的优点和缺点。
目的：
通过比较结扎CMVL前后HS大鼠肺部基因表达谱的差异，寻找其中的异常和特征转录本，解释结扎CMVL对肺部组织的影响方式与机制，为深层次理解CMVL技术的临床应用提供依据。
实验设计：
本实验将随机分为对照组（C组）和实验组（E组）。每组8只大鼠。E组将进行HS诱导和CMVL结扎操作，术后3小时，进行心肺复苏术，收集肺部组织标本。而C组将仅进行HS诱导操作，术后3小时，同样进行收集标本。准备提取RNA并进行与探针杂交。提取过程中将注意RNA的质量和含量，在此基础上，制备杂交物，对实验结果进行扫描测定和数据处理，得出基因差异表达的结果。同时，完成生物信息学分析。
实验内容：
（1）麻醉：将大鼠卧位，用异氟醚麻醉大鼠。
（2）皮肤消毒：大鼠左侧腹侧用4.0%的氢氧化钠进行局部皮肤消毒。
（3）定位：右侧在乳头下方开口，暴露右侧肠系膜。利用放大镜器械取出肠系膜，找到较大的淋巴管。缝线结扎。
（4）术后护理：用生理盐水冲洗术后出血部位。术后饲养三小时后，将大鼠处死。从接割口给予0.5倍计量的心肺复苏液。分别收集肺部标本。
（5）RNA提取并质量检测：将肺部标本快速冷冻，并送至实验室进行RNA提取，测定提取后RNA的质量和含量。
（6）DNA微阵列杂交：进行杂交物制备，并进行杂交。完成后，在扫描仪中扫描芯片，并对数据进行处理。
（7）数据分析：选择Chipster生物信息工具箱和DAVID7.0进行基因差异表达分析和生物学信息学分析。
（8）结果解读：分析Chipster和DAVID产生的结果，并得出在CMVL结扎前后差异表达的特征分子，以及其在HS大鼠的表达模式。解释这种差异主要受哪些基因调节。以及这种调节通常意味着什么。
实验结果：
本实验的主要结果是肺部基因表达谱与不同基因组的代表。通过对两组之间差异的分析，可以发现大量的基因组差异代表，预测出组织发生的生物学变化，并为下一步对这些差异代表的研究提供有价值的信息。我们期望得到包括差异表达基因在内的基因组特征，进一步寻找灵敏和确定性的展开这种技术的临床应用的方法，以及对结扎CMVL技术所涉及的生物过程的深层次理解。
参考文献：
1.LiX,LiuY,WanX.Treatmentofcecallymphangionperfusiondisorderbyinsituclosingonrats.2013.
2.RajashreeP,OdellDD,MashburnD,etal.ComparisonoftheeffectsofCCKandKYNAoncardiodynamicandvascularresponsesinsepticrats.Shock(Augusta,Ga).2010:533.
3.ChenH,SongX,XuY,etal.AmicroRNAsignatureincirculatingexosomesisassociatedwiththeriskofAlzheimer'sdiseaseinpatientswithtype2diabetes.Aging.2019;11(24):12874–12891.doi:10.18632/aging.102638.