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枯草芽孢杆菌溶栓酶的分离纯化及其酶学性质研究的任务书 任务书 一、任务背景 枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)是一种广泛分布于自然环境中的细菌,其具有较强的生物多样性和生态适应性。其在发酵工业、生物农药、医药等领域具有广泛应用,是极具潜力的微生物资源之一。其中,枯草芽孢杆菌溶栓酶具有良好的应用前景,可应用于消化道疾病、白血病等领域,因此对该酶的分离纯化及其酶学性质进行研究,具有重要的理论和应用意义。 二、任务目的 本研究旨在对枯草芽孢杆菌溶栓酶进行分离纯化,并对其酶学性质进行研究。具体包括以下目标: (1)通过培养、离心、超滤等技术,获得含有枯草芽孢杆菌溶栓酶的发酵液; (2)通过酶活性测定、SDS-PAGE等技术,对发酵液进行分析,并确定最优提取条件; (3)通过吸附、离子交换、凝胶过滤等技术对酶进行分离纯化,获取较高纯度的枯草芽孢杆菌溶栓酶; (4)对纯化后的酶进行酶学性质研究,包括对其最适反应条件、酶动力学参数等的测定。 三、任务步骤 (1)枯草芽孢杆菌菌种的培养与发酵液的获得: 采用液态培养基进行培养,筛选出含有枯草芽孢杆菌溶栓酶的发酵液,并通过离心、超滤等技术将其浓缩。 (2)对发酵液进行分析: 采用酶活性测定和SDS-PAGE等技术,对发酵液进行分析,并确定最优提取条件。 (3)酶的分离纯化: 运用吸附、离子交换、凝胶过滤等技术对酶进行分离纯化,以获得较高纯度的枯草芽孢杆菌溶栓酶。 (4)酶学性质研究: 对纯化后的枯草芽孢杆菌溶栓酶进行酶学性质研究,包括对其最适反应条件、酶动力学参数等的测定。 四、任务计划 进度表: |项目|计划完成时间|实际完成时间| |---|---|---| |枯草芽孢杆菌的菌种筛选和发酵液的获得|1个月|| |发酵液的分析|1个月|| |酶的分离纯化|3个月|| |酶学性质研究|2个月|| 五、参考文献 1.KooOK,JeongYT,AhnJ(2017).AnalysisofextracellularproteaseandglucosedehydrogenaseactivityfromBacillussubtilisKCCM11209.한국식품과학회지.49(6). 2.RayA,MandalAK,LahiriAK,DasSK(2014).IsolationandcharacterizationofmanyfibrinolyticenzymesfromKoreansources.AfricanJournalofBiotechnology.13(7):862-875. 3.KimDH,SohnJH,LeeYJ,YangCW,RyuCS,LeeSM,JoJK,LeeJH(2014).FibrinolyticenzymeproductionofBacillussubtilisCH-2isolatedfromcheonggukjang.AppliedBiologicalChemistry.57(3):437-445.