猪DGAT1基因肌肉超表达转基因小鼠及克隆猪的检测验证的任务书.docx

猪DGAT1基因肌肉超表达转基因小鼠及克隆猪的检测验证的任务书
任务书
一、任务背景
猪是我国重要的畜牧业生产动物之一，其肉质品质的提高一直是生产者和消费者所关注的问题。其中，肌肉中脂肪含量的增加和分布是影响肉质品质的重要因素之一。目前，研究表明，DGAT1（甘油三酯合成酶）基因与猪肉脂肪含量相关。通过基因编辑技术和转基因技术，对猪肉的脂肪含量进行调控，成为了当前的研究热点。
本次任务将针对猪DGAT1基因进行研究，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和转基因技术，构建表达猪DGAT1基因转基因小鼠模型，进而克隆表达DGAT1基因的猪种，通过验证猪肉脂肪含量的变化，为猪肉产业提供科学依据。
二、任务内容
1.构建表达猪DGAT1基因转基因小鼠模型
(1)设计基因编辑引物，合成单链RNA（sgRNA）片段和基因编辑模板，进行注射和导入进入小鼠受精卵中。
(2)检测基因编辑效率和筛选编辑成功的基因型小鼠。
(3)将猪DGAT1基因转基因载体导入小鼠胚胎，获得表达猪DGAT1基因转基因小鼠。
2.克隆表达DGAT1基因的猪种
(1)通过胚胎移植技术，将表达DGAT1基因的猪基因导入到母猪卵细胞内。
(2)筛选出具有正确基因型的猪胚胎，进行移植。
(3)检测移植后猪胚胎的妊娠率和胎次，获得表达DGAT1基因的猪种。
3.验证表达DGAT1基因的猪肌肉脂肪含量变化
(1)收集表达DGAT1基因的猪和非转基因猪的肉样，测定其肌肉脂肪含量。
(2)对比表达DGAT1基因的猪和非转基因猪的肌肉脂肪含量，验证猪DGAT1基因的调控效果。
三、任务要求
1.设计合理的实验方案，并制定实验操作规程。
2.熟练掌握CRISPR/Cas9基因编辑技术和转基因技术的实验操作。
3.规范实验数据的采集和处理，生成准确可靠的实验结果。
4.编写完整的实验报告，撰写可行的应用方案和创新性思路。
四、预期成果
1.构建基因编辑和转基因技术的操作流程，促进猪肉产业现代化。
2.获得表达DGAT1基因的转基因小鼠模型，为后续的相关研究提供实验基础。
3.成功克隆表达DGAT1基因的猪种，验证其在猪肌肉中脂肪含量的变化效果，为猪肉产业提供科学依据。
五、工作计划和经费预算
本任务计划从2022年1月起，历时两年完成。
1.实验材料费用预算（单位：元）
项目|预算金额|备注|
-------------------------|-------------------|----------------------|
基因编辑引物和模板|50000||
CRISPR/Cas9试剂|80000||
猪DGAT1基因表达载体|100000||
小鼠饲料和住宿费|50000|每年25000元|
猪胚胎移植费用|200000||
肉样采集和实验耗材|50000||
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总计|530000||
2.人员支出预算（单位：元）
项目|预算金额|备注|
-------------------------|-------------------|--------------------------|
主任科学家|200000|每年100000元|
实验技术人员|400000|每年200000元|
博士后|300000|每年150000元|
硕士研究生|120000|每年60000元|
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总计|1020000||
3.实验设备及场地费用预算（单位：元）
项目|预算金额|备注|
------------------------|-------------|-----------|
转基因技术实验设备|800000||
实验室场地租赁费用|200000|每年100000元|
-------------------------|-------------|-----------|
总计|1000000||
4.总经费预算（单位：元）
项目|预算金额|备注|
-----------------------|-------------|------------|
实验材料费用|530000||
人员支出费用|1020000||
实验设备及场地费用|1000000||
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总计|2050000||
六、申报单位声明
本任务的完成单位是XXX大学，拟提交的研究计划是科研人员的合法、合规性、严谨性质、符合科学伦理和相关法规要求