大豆热激蛋白90(Hsp90)家族基因的克隆及功能初步研究的任务书.docx

大豆热激蛋白90(Hsp90)家族基因的克隆及功能初步研究的任务书
任务书：
题目：大豆热激蛋白90(Hsp90)家族基因的克隆及功能初步研究
目的：本研究的目的是克隆大豆中的Hsp90基因，并初步探究其功能特性，为深入研究大豆Hsp90基因家族的生物学作用提供基础数据。
研究内容：
1.大豆Hsp90基因家族的克隆
使用大豆基因组信息，设计引物并进行PCR扩增，获得大豆Hsp90基因家族的DNA序列，进行序列分析，尝试鉴定不同Hsp90基因的亚型，并与已有的Hsp90家族基因进行比对与分析。
2.Hsp90基因的表达特性
采用qPCR和Westernblot等检测手段，确定Hsp90基因家族在大豆不同部位和不同生长阶段的表达水平与时空特征，分析其差异表达与功能特性。
3.研究Hsp90基因与大豆生长发育及环境逆境胁迫的相关性
利用大豆生长发育及环境逆境胁迫的相关实验，探究不同Hsp90基因家族的变化趋势，研究其在大豆生长发育、逆境胁迫等方面的功能特性及机理。
4.Hsp90基因家族对大豆植株免疫系统的影响
探究Hsp90基因家族在大豆植株免疫系统中的作用，研究相应的信号依赖性途径机制，分析其与其他信号转导途径的相互作用关系。
研究方法：
1.大豆基因组数据库检索与分析
在NCBI等数据库寻找大豆中Hsp90基因家族的相关信息及已知的基因序列，进行序列比对，分析亚型信息。
2.PCR扩增和克隆
设计引物并进行PCR扩增，使用限制酶对扩增产品进行克隆，纯化重组质粒，进行测序。
3.qPCR实验
使用同源标准曲线法，检测样品中的Hsp90基因家族在表达数量上的变化水平。
4.Westernblot实验
使用Westernblot检测大豆中Hsp90家族基因蛋白在不同时期和不同部位的表达水平，分析其差异表达与功能特性。
预期成果：
1.成功克隆大豆Hsp90基因家族的DNA序列。
2.确定大豆不同部位和不同生长阶段内Hsp90基因家族的表达水平和时空特性，并分析其差异表达与功能特性。
3.探究不同Hsp90基因家族对大豆生长发育及环境逆境胁迫的相关性。
4.研究Hsp90基因家族在大豆植株免疫系统中的作用，分析其与其他信号转导途径的相互作用关系。
计划时间：
2021年1月-2022年12月，共24个月。
经费预算：
本研究涉及到大豆基因组分析、PCR扩增、克隆、qPCR、Westernblot等实验室技术，预计需要经费15万元。
参考文献：
WuZ,LiJ,ZhangJ,etal.Thesoybean(Glycinemax)HSP90genefamily:identification,phylogenetic,andexpressionanalysis[J].Genes&Genomics,2015,37(9):705-716.
XuF,HuangQ,TaoX,etal.Genome-wideidentification,evolutionandfunctionalanalysisoftheheatshockprotein90familyinsoybean[J].BMCGenomics,2019,20(1):123.