嗜酸乳杆菌对重型颅脑损伤小鼠小肠钙敏感通路影响的研究的任务书.docx

嗜酸乳杆菌对重型颅脑损伤小鼠小肠钙敏感通路影响的研究的任务书
任务书
一、研究背景
重型颅脑损伤（SevereTraumaticBrainInjury，STBI）常常与多系统器官功能障碍（MultipleOrganDysfunctionSyndrome，MODS）相关联，其中小肠属于最易受损的器官之一。过去的研究表明，STBI后小肠黏膜屏障受到明显破坏，导致肠壁通透性增加，从而引发肠内毒素和细菌等有害物质进入体内，使机体处于长期的炎症反应状态，加重病情。而嗜酸乳杆菌能够调节宿主机体的免疫系统及其相关炎症反应，改善机体的肠道功能和健康状况，因此被广泛应用于调节肠道微生态平衡、改善肠道屏障功能等领域。
然而，在STBI后小鼠中嗜酸乳杆菌对小肠离子通道和细胞凋亡的影响并未得到明确的解释，因此有必要探究嗜酸乳杆菌是否能够通过影响小肠钙敏感通道，从而改善STBI后小肠屏障的完整性和健康状态，防止机体免疫功能的紊乱和干扰。
二、研究目的
本研究旨在探究嗜酸乳杆菌对STBI小鼠小肠钙敏感通道的影响，以及探究其在改善小肠屏障、调节免疫功能以及提高机体健康状况中的作用。
三、研究内容和方法
1.研究对象
使用32只C57BL/6J雄性小鼠，体重20-25g，按随机数字表法随机分成对照组（8只）和实验组（24只）。
2.建立STBI动物模型
在对照组和实验组麻醉后都脱毛和消毒，接着，实验组经过切开头皮、剥离颅骨窗、操作脑外伤后，再进行颅骨修复、伤口缝合；对照组仅进行颅骨窗和颅骨修复。手术完成后，小鼠恢复常温下的自然呼吸，放回各自的笼子里。
3.嗜酸乳杆菌培养和剂量浓度确定
选取优良菌株（ATCC43121）进行培养，并通过光密度计检测其浓度，最终确定其使用的剂量浓度。
4.实验组分组与处理
实验组随机分为3个子组，分别为处理组、未处理组和对照组；对照组和未处理组都给予PBS，而处理组采用口服嗜酸乳杆菌悬液。处理组和未处理组均在STBI后24小时开始处理，每天每只小鼠均口服2×10^8CFU的嗜酸乳杆菌悬液，处理持续5天。
5.采集样本和分析
在处理5天后，所有小鼠在规定の时间点和方式下采集便后大便及血液样本，采用qRT-PCR、免疫组织化学染色、电生理技术和显微技术等方法，对钙敏感通道的表达、肠道黏膜屏障的完整性以及免疫异常情况进行监测与记录，并进行数据分析。
四、预期结果
经过实验组和对照组比较后，预期得到以下实验结果：在STBI小鼠小肠钙敏感通道的实验组与对照组的比较中，嗜酸乳杆菌能够明显地提高钙敏感通道在小鼠小肠中的表达量；同时，处理组的小肠黏膜完整且免疫异常情况明显减少，相对于对照组的明显改善。此外，处理组中的肠道排便情况也会得到较为明显的改善。
五、参考文献
1.AlejandraM.etal.ProbioticsImproveGutEpithelialBarrierFunctioninRatsFollowingSevereTraumaticBrainInjury[J].NeurogastroenterologyandMotility,2013,25(9):e573-e584.
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