猕猴胚胎干细胞的分离建系和猕猴胚胎干细胞microRNAs表达谱的研究的任务书.docx

猕猴胚胎干细胞的分离建系和猕猴胚胎干细胞microRNAs表达谱的研究的任务书
任务书
一、任务背景
干细胞研究是生物医学领域的热点之一，其应用前景广泛。猕猴（Macacafascicularis）为灵长类动物，与人类的遗传、生理、行为等方面具有较高的相似度，因此被广泛应用于临床研究和生物医学实验。猕猴胚胎干细胞（Macaqueembryonicstemcells,MESCs）作为一种重要的干细胞类型，具有潜在的应用前景。然而，目前对MESCs的分离建系和相关基因的表达调控机制等方面的研究尚不充分。因此，本项目旨在对猕猴胚胎干细胞进行分离建系和microRNAs表达谱的研究。
二、任务目标
1.分离建系猕猴胚胎干细胞
（1）采集猕猴胚胎组织：选择有代表性的猕猴胚胎组织，进行收集处理，确保样本的质量和数量符合实验需求。
（2）初始培养：将采集到的胚胎组织进行切割处理，将其分离到含有MESCs培养基的培养皿中，初始培养。
（3）维持培养：对细胞进行细心处理，保证其体系的平稳运行和细胞状态的健康，使其适应MESCs培养基环境。
（4）分离学：利用细胞学和遗传学方法对MESCs进行分离鉴定，采用流式细胞术或传统细胞分离技术进行MESCs的筛选，最终获得稳定的MESCs细胞系。
2.miroRNAs表达谱的研究
（1）RNA提取：在不影响MESCs生长和分裂的前提下，将经过初步筛选的MESCs细胞系进行处理，使用RNA提取试剂盒提取胚胎干细胞总RNA，分离其中的microRNAs。
（2）microRNAs表达水平分析：采用高通量测序技术对MESCs中的microRNAs进行全面筛查和分析，获得microRNAs的表达谱数据，从中筛选出具有重要意义的genomicregions并分析其功能。
（3）microRNAs的功能分析：利用基因组学和生物信息学的手段，对screeningout的microRNA进行进一步的功能分析和生物学意义分析。
三、任务挑战
本研究面临的挑战主要是：
（1）对猕猴胚胎组织的采集难度相对较大，要求实验人员具备高超的动物手术技能。
（2）MESCs的分离建系技术相对复杂，需要实验人员精细操作和反复实验。
（3）对microRNAs的表达谱进行全面筛查的过程中，需要面对庞大的数据量和复杂的数据处理方法。
四、实验计划
本实验计划分为三个阶段：
第一阶段：2019年4月-2019年5月
采集猕猴胚胎组织，初始培养，并进行维持培养。
第二阶段：2019年6月-2019年8月
对MESCs进行筛选，分离出稳定的MESCs细胞系。并进行RNA提取，获得microRNAs样本，并进行高通量测序。
第三阶段：2019年9月-2019年12月
筛选并分析microRNAs的表达谱，进行数据整合和分析，并进一步进行microRNAs的功能分析。
五、预期成果
本研究预期结果是：
1.成功分离猕猴胚胎干细胞，并建立一种有效的分离建系方法；
2.筛选出猕猴胚胎干细胞的microRNAs表达谱，并分析其功能和生物学意义；
3.为猕猴胚胎干细胞及其microRNAs的研究提供实验基础和理论指导。
六、研究经费
本研究所需经费为XX万元，包括实验设备、耗材、动物采集及饲养费用、科研人员工资等。
七、研究时间
本项目计划在2019年4月开始，预计将于2019年12月完成。
八、研究方案评估
本研究方案将由研究人员进行撰写和评估，并由独立评审委员会进行审查和审定。进行本研究所需的科研人员将具备相关技术和理论基础，并保证实验过程中的伦理和安全问题得到妥善处理。