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LB培养基怎样配制 LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(GiuseppeBertani)的说法,这个名字来源于英语lysogenybroth,即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。 LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。 酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。 胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。 酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。 在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。 由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。 LB培养基配方(每升) 酵母提取物5g 胰化蛋白胨10g 氯化钠10g NaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌. LB固体培养基 LB培养基1L 琼脂粉15g NaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。 有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。 LB培养基用途: 用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养. LB培养基使用原理: 蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。 LB培养基配制方法 配制每升HYPERLINK”file:///F:\\推广软件\\网络编辑超级工具箱\\网编工具\\Bin\\www。huankai。com"培养基,应该在950ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化蛋白胨10g酵母提取物5gNaCl10g摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7。0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。 1.LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素,并且倒好板。LB固体培养基倒板1。配制:100mlLB培养基加入1。5g琼脂粉 2。抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。 3。倒板:一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。 4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用.配400ml的话成分按比例减少就行了,pH还是要按规定的。