将军菊苣DREB家族基因的克隆、功能研究及其遗传转化体系的建立的任务书.docx

将军菊苣DREB家族基因的克隆、功能研究及其遗传转化体系的建立的任务书
任务书
一、任务背景
将军菊苣（CichoriumintybusL.var.sativumL）是一种重要的蔬菜，其具有丰富的营养价值和生物活性成分。然而，将军菊苣在逆境条件下的生长性能较差，对于高温、干旱、盐碱等逆境条件表现出的抗性也较低。因此，提高将军菊苣在逆境条件下的抗性，对于提高其生产效益和质量具有重要的意义。DREB基因家族是逆境胁迫下响应的关键基因，参与植物的生长和发育过程中的多种逆境胁迫反应。在将军菊苣中克隆DREB基因家族成员，对于分析其功能、探究其遗传转化机制具有重要作用。
二、任务目的和内容
1.克隆将军菊苣DREB基因家族成员
采用PCR方法，以已知DREB基因家族保守区域作为引物，从将军菊苣基因组中克隆DREB基因家族成员。利用克隆获得的基因序列，进行生物信息学分析，包括比对、聚类、进化树构建等，分析不同DREB基因家族成员的进化关系和结构特点。
2.分析将军菊苣DREB基因家族成员的功能
在逆境环境下，利用qRT-PCR等方法，分析将军菊苣DREB基因家族成员在不同逆境条件下的表达模式和差异。在基因敲除、基因过表达等实验中评估DREB基因家族成员对逆境的响应能力和适应性，阐明其在逆境响应中的功能。
3.建立将军菊苣DREB基因家族遗传转化体系
将筛选得到的适合转基因表达的DREB基因家族成员构建入植物表达载体中，通过基因枪、农杆菌介导转化等多种转化方法将其导入将军菊苣中，建立稳定的遗传转化体系。在不同逆境条件下，检测转基因植物的生长影响和逆境胁迫响应能力。
三、执行方法和技术路线
1.克隆将军菊苣DREB基因家族成员
2.分析将军菊苣DREB基因家族成员的功能
（1）培养将军菊苣，并在高温、干旱、盐碱等逆境条件下进行处理；
（2）提取RNA，逆转录合成cDNA；
（3）利用qRT-PCR方法检测DREB基因家族成员在逆境环境下的表达谱。
3.建立将军菊苣DREB基因家族遗传转化体系
（1）筛选适合转基因表达的DREB基因家族成员；
（2）将筛选得到的基因载入植物表达载体中；
（3）利用基因枪、农杆菌介导转化等方法将载体转化入将军菊苣；
（4）对获得的转基因植物进行筛选和鉴定。
四、预期成果
1.克隆获得将军菊苣DREB基因家族成员，并分析不同基因成员的结构和进化关系。
2.利用qRT-PCR等方法，分析DREB基因家族成员在逆境条件下的表达模式和响应差异。
3.建立稳定的将军菊苣DREB基因家族遗传转化系统，评估转基因植物在逆境响应中的生长影响和逆境适应能力。
五、参考文献
1.LiuH,WangQ,HeY,etal.CloningandexpressionanalysisofaDREB2-likegenefromchrysanthemum(Dendranthema×grandiflorum)[J].PlantPhysiology&Biochemistry,2012,60:12-19.
2.LiuXL,YangLT,LiYR,etal.IsolationandexpressionanalysisofDREBgenefamilyincommonwheat(TriticumaestivumL.)[J].ActaPhysiologiaePlantarum,2013,35(2):487-497.
3.LiP,SuiN,ZhaoY,etal.CloningandexpressionanalysisofTaDREB3,adrought-responsivegenefromwheat[J].ElectronicJournalofBiotechnology,2016,22:084-091.