人脑肿瘤干细胞样抗原致敏树突状细胞免疫治疗胶质瘤的体外研究的任务书.docx

人脑肿瘤干细胞样抗原致敏树突状细胞免疫治疗胶质瘤的体外研究的任务书
一、研究背景
胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤之一，占所有原发性脑肿瘤的50%以上。目前采用的标准治疗方法包括手术、放射治疗、化学治疗或其组合，然而其预后仍然较差，5年生存率约为30%。因此，寻找新的治疗方法是非常必要的。
树突状细胞是一类具有强大免疫调节作用的免疫细胞，其主要职责是与T细胞相互作用，激活T细胞，从而启动或增强免疫反应。近年来，树突状细胞免疫治疗被广泛应用于肿瘤治疗。而在肿瘤免疫治疗中，肿瘤干细胞样抗原（TumorStemCell-LikeAntigen，TSCA）作为新兴的肿瘤治疗靶点之一，越来越受到重视。
二、研究目的
本研究旨在探索人脑肿瘤干细胞样抗原致敏树突状细胞免疫治疗胶质瘤的体外效果，为该疗法的临床应用提供实验基础。
三、研究内容
1.提取胶质瘤患者的肿瘤组织，并从中筛选出干细胞样细胞（CSCs）。
2.通过CCK-8实验，筛选出适宜培养人工合成短肽，即TSCA肽段。
3.提取外周血单个核细胞并经过离心、渗透等步骤得到树突状细胞（DCs）。
4.将靶向TSCA肽段的抗原负载至DCs表面，并完成细胞的致敏，使DCs成为能够刺激免疫应答的细胞。
5.采用流式细胞仪检测DCs的表型及其表达的基因，以确定致敏是否成功。
6.采用ELISA法检测DCs细胞上TSCA肽段的表达水平。
7.采用实时荧光定量PCR检测DCs细胞内TSCAmRNA的表达量。
8.采用CCK-8实验分析TSCA肽段致敏后的DCs对于不同胶质瘤细胞株的免疫杀伤作用。
9.对免疫杀伤效果最佳的DCs进行细胞活性检测和诱导杀伤率检测。
10.通过相关指标的检测，分析TSCA肽段致敏后DCs的免疫效果。
四、计划进度
本研究的计划进度如下：
第1-2个月：搜集文献资料，准备实验用品。
第3-4个月：提取胶质瘤组织，并从中筛选出CSCs。
第5-6个月：筛选出适宜培养TSCA肽段。
第7-8个月：提取外周血单个核细胞，得到DCs。
第9-10个月：将抗原负载至DCs表面及完成致敏。
第11-12个月：分析TSCA肽段致敏后DCs的免疫效果，总结实验结果并撰写论文。
五、预期结果
本研究预期结果如下：
1.成功提取胶质瘤患者的CSCs，确立TSCA肽段。
2.培养出适合实验需求的DCs。
3.成功将抗原负载至DCs表面并完成致敏。
4.完成对TSCA肽段致敏后DCs的免疫效果评估。
5.实验结果为人脑肿瘤干细胞样抗原致敏树突状细胞免疫治疗胶质瘤提供实验基础。