姜黄素逆转人结肠癌细胞株HCT-8VCR多药耐药的实验研究的任务书.docx

姜黄素逆转人结肠癌细胞株HCT-8VCR多药耐药的实验研究的任务书
任务书
姜黄素逆转人结肠癌细胞株HCT-8VCR多药耐药的实验研究
一、任务背景
结肠癌是常见的消化系统肿瘤，其死亡率位居恶性肿瘤第二位。多药耐药一直是肿瘤治疗中的一大难题，常规化疗和靶向治疗等治疗手段都会在一定程度上诱导多药耐药的形成，从而减少治疗效果。姜黄素是一种来源广泛、价格便宜、无毒副作用的天然化合物，近年来研究发现姜黄素可以逆转癌细胞的多药耐药。因此，本次实验旨在研究姜黄素对人结肠癌细胞株HCT-8VCR多药耐药的影响，为肿瘤多药耐药的治疗提供参考。
二、研究目的
1.探究姜黄素对HCT-8VCR多药耐药的作用机制。
2.研究姜黄素能否逆转HCT-8VCR细胞的多药耐药。
三、研究内容
1.建立HCT-8VCR多药耐药的细胞株模型。
2.分析HCT-8VCR细胞的多药耐药特性及其与细胞凋亡的关系。
3.不同浓度姜黄素处理多药耐药的HCT-8VCR细胞，分析姜黄素对细胞的影响。
4.探究姜黄素逆转HCT-8VCR细胞的多药耐药的作用机制。
四、研究方法
1.建立HCT-8VCR多药耐药的细胞株模型。
选取结肠癌细胞株HCT-8作为起点，通过长期培养在含有化疗药物多柔比星的培养基中，筛选出多药耐药的细胞株HCT-8VCR，建立多药耐药的细胞株模型。
2.分析细胞的多药耐药特性及其与细胞凋亡的关系。
通过MTT法检测不同药物对HCT-8和HCT-8VCR细胞的药敏性，研究HCT-8VCR细胞的多药耐药特性及其与细胞凋亡的关系。
3.处理多药耐药的HCT-8VCR细胞，分析姜黄素对细胞的影响。
将不同浓度的姜黄素处理HCT-8VCR细胞，通过MTT法检测细胞的存活率和细胞凋亡率，分析姜黄素对HCT-8VCR细胞的作用。
4.探究姜黄素逆转HCT-8VCR细胞的多药耐药的作用机制。
通过Westernblot、Real-timePCR等技术，研究姜黄素对HCT-8VCR细胞的PGP表达、Bcl-2/Bax比值、AKT/mTOR通路等信号通路的影响。
五、实验条件
1.实验设备:细胞培养箱、流式细胞仪、荧光共聚焦显微镜、逆转录-PCR仪、蛋白质电泳装置等。
2.实验材料:结肠癌细胞株HCT-8、多药耐药的结肠癌细胞株HCT-8VCR、姜黄素等。
六、研究意义
1.为深入研究肿瘤多药耐药机制提供参考依据。
2.为寻找肿瘤多药耐药的治疗方法提供新的思路。
七、预期成果
1.建立HCT-8VCR多药耐药的细胞株模型。
2.分析HCT-8VCR细胞的多药耐药特性及其与细胞凋亡的关系。
3.发现姜黄素可以逆转HCT-8VCR细胞的多药耐药。
4.探究姜黄素逆转HCT-8VCR细胞的多药耐药的作用机制。
八、研究计划
1.前期准备阶段：2个月
购买实验所需器材和试剂。培养HCT-8和HCT-8VCR细胞。
2.建立HCT-8VCR多药耐药的细胞株模型：2个月
通过长期培养在含有多柔比星的培养基中，筛选出多药耐药的细胞株HCT-8VCR，建立多药耐药的细胞株模型。
3.分析细胞的多药耐药特性：2个月
通过MTT法检测不同药物对HCT-8和HCT-8VCR细胞的药敏性，研究HCT-8VCR细胞的多药耐药特性。
4.处理多药耐药的HCT-8VCR细胞，分析姜黄素对细胞的影响：3个月
将不同浓度的姜黄素处理HCT-8VCR细胞，通过MTT法检测细胞的存活率和细胞凋亡率，分析姜黄素对HCT-8VCR细胞的作用。
5.探究姜黄素逆转HCT-8VCR细胞的多药耐药的作用机制：3个月
通过Westernblot、Real-timePCR等技术，研究姜黄素对HCT-8VCR细胞的PGP表达、Bcl-2/Bax比值、AKT/mTOR通路等信号通路的影响。
6.论文撰写和提交：1个月
九、参考文献
1.SuzukiH,TerashimaM,TsurutaniJ,etal.AphaseIIstudyofcombinationtherapywithS-1andirinotecaninpatientswithpreviouslytreatednon-small-celllungcancer.AnnOncol,2010,21(7):1480-1486.
2.GottesmanMM,FojoT,BatesSE.Multidrugresistanceincancer:RoleofATP-dependenttransporters.NatRevCancer,2002,2(1):48-58.
3.KangYJ,LeeSH,SeoKH,etal.Molecularmechanismsofceramide-mediatedtelomeraseinhibitionintheA549humanlungadenocarc