EGCG调控TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞上皮-间质转化的实验研究的任务书.docx

EGCG调控TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞上皮-间质转化的实验研究的任务书
任务书：EGCG调控TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞上皮-间质转化的实验研究
背景
头劲鳞癌是头颈部最常见的恶性肿瘤之一，其易于转移和耐受化疗等特点导致治疗难度较大。在肿瘤转移中，上皮-间质转化（EMT）被认为是重要的途径之一。TGF-β1对于EMT的诱导起到了极为重要的作用。同时，EGCG是茶叶中的重要成分之一，其对于肿瘤具有一定的治疗效果。因此，本实验旨在探究EGCG是否能够调控TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT。
研究内容
1.确定TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT模型。本实验选取适合的头劲鳞癌细胞，利用Westernblot和免疫荧光法检测EMT相关标志物的表达情况，确定TGF-β1的最适诱导浓度、诱导时间和诱导成功率，建立头劲鳞癌细胞EMT模型。
2.确定EGCG的剂量和作用时间。本实验将头劲鳞癌细胞分为多组，分别加入不同浓度的EGCG，观察EGCG对于细胞形态、细胞增殖和细胞周期的影响，确定EGCG的最适剂量和作用时间。
3.研究EGCG对TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT的影响。将头劲鳞癌细胞分为多组，分别加入不同浓度的EGCG和TGF-β1，观察EMT相关标志物的表达情况，探究EGCG是否能够抑制TGF-β1诱导的EMT，并确定其剂量和作用时间效应。
4.探究EGCG调控TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT的机制。通过Westernblot和RT-PCR等方法，研究EGCG对于CXCR4/CXCL12信号通路和miR-200家族等与EMT相关的分子的表达和调控情况。
研究意义
本实验将有助于探究EGCG是否能够抑制TGF-β1诱导的EMT，为头颈部肿瘤的治疗提供新的思路和方法。同时，本实验还将有助于进一步研究EGCG对于CXCR4/CXCL12信号通路和miR-200家族等与EMT相关的分子的调控作用，为肿瘤发生发展的机制研究提供有益的线索。
研究方法和技术路线
1.细胞培养技术：选择适宜的头劲鳞癌细胞，进行培养、传代和保存。
2.Westernblot技术：分离载体、电泳、转膜、孵育抗体和成像等。
3.免疫荧光技术：制备标本、孵育抗体和成像等。
4.细胞形态观察：显微镜下观察细胞外形、大小、数量等。
5.细胞增殖实验：MTT法、CCK-8法等。
6.细胞周期实验：流式细胞仪技术等。
7.分子生物学技术：RNA提取、RT-PCR法等。
计划进度
第1-2周：确定头劲鳞癌细胞EMT模型并筛选合适的EGCG剂量和作用时间。
第3-4周：观察EGCG对于细胞形态、增殖和周期的影响。
第5-6周：观察EGCG对TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT的影响。
第7-8周：探究EGCG调控TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT的机制。
第9-10周：数据分析和结果讨论。
第11-12周：撰写实验报告及毕业论文。
预期结果
1.建立了TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT模型，并确定了最适诱导浓度、诱导时间和诱导成功率。
2.确定了EGCG的最适剂量和作用时间，并观察了其对于细胞形态、增殖和周期的影响。
3.EGCG能够抑制TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT，并且作用剂量和时间具有明显效应。
4.EGCG通过调控CXCR4/CXCL12信号通路和miR-200家族等与EMT相关的分子，发挥对TGF-β1诱导的头劲鳞癌细胞EMT的调控作用。
参考文献
1.段蕾,王莲花.EGCG抑制人大肠癌细胞上皮-间质转化的作用[J].中国药理学通报,2010,26(5):625-628.
2.刘德卫.CXCR4/SDF-1信号通路在上皮-间质转化中的研究新进展[J].口腔医学研究,2018,34(1):119-123.
3.李凯,段松涛,孙子豪.miR-200a对上皮-间质转化的调节作用及其机制研究[J].中国人兽共患病学报,2018,34(6):156-161.