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水稻抗虫相关基因OsSABATH12和OsJMT1的功能分析的任务书 一、任务背景 水稻是世界上重要的粮食作物之一,但是由于虫害的影响,水稻的产量有时会受到很大的威胁。因此,研究水稻的抗虫机制,特别是相关基因的功能,对于水稻抗虫育种具有重要意义。 OsSABATH12和OsJMT1是被发现与水稻抗虫性相关的两个基因,它们都是酸性甲基转移酶基因家族的成员,它们可能参与了水稻产生抗虫性的过程中。因此对于这些基因的功能深入研究,对于了解水稻的抗虫机制,帮助农业生产具有重要意义。 二、任务内容 1.研究背景和目的:对OsSABATH12和OsJMT1作为水稻抗虫机制的重要角色,开展功能研究。 2.研究方法:使用基因编辑技术对这两个基因进行相应的敲除实验。并对敲除后的水稻与对照水稻进行对比分析,探究这两个基因的功能。 3.实验设计:设计适合的gRNA序列,利用基因编辑技术对水稻基因组进行敲除。并进行转录组和代谢组分析。 4.预期结果:通过敲除这两个基因,能够解析它们在水稻抗虫性中的作用。预计敲除这两个基因后会对水稻的抗虫性呈现负面影响。 5.意义:水稻是全球最重要的农作物之一,水稻的抗病虫育种是提高水稻生产效能的重要措施之一。深入了解水稻的抗虫机制和相关基因功能,能够对于水稻抗病虫育种起到重要的推动作用。 三、任务计划 1.实验前期准备(时间:2周): (1)制备所需试剂和培养基; (2)设计gRNA序列; (3)检测gRNA构建质量。 2.基因敲除(时间:1个月): (1)通过基因编辑技术对OsSABATH12和OsJMT1进行敲除; (2)检验敲除质量,提取DNA鉴定。 3.转录组测序(时间:1个月): (1)收集敲除后和对照水稻的完全展开的三个生长阶段的叶片,总RNA的提取和纯化; (2)转录组建库,高通量测序; (3)RNA-seq数据的分析。 4.代谢组分析(时间:1个月): (1)在相应的时期,使用手持式代谢组分析仪对敲除后的水稻和对照水稻进行分析; (2)用无损数据的拟合,计算代谢物的量; (3)与数据库进行比对。 5.抗虫性分析(时间:1个月): (1)在相应的时期,测量敲除后与对照水稻的叶片抗虫性; (2)进行相应实验数据的统计分析和结果处理。 6.数据分析与报告(时间:2周): (1)综合分析转录组和代谢组分析结果; (2)撰写实验报告。 四、参考文献 1.Wu,J.,Zhu,C.,Chen,S.,Lei,M.,&Shang,H.(2016).CloningandcharacterizationoftheOsSABATHgenefamilyinvolvedinplanthormonehomeostasisinrice.ChineseJournalofRiceScience,30,589-598. 2.Wang,F.,Wang,K.,Zhang,Y.,Chen,X.,Liu,J.,&Yan,X.(2019).OverexpressionofOsSABATH12,anIndole-3-AceticAcidMethyltransferase,EnhancesRiceInsectResistance.FrontiersinPlantScience,10,793. 3.Xu,X.,Liu,Y.,Zhu,B.,Zhao,Y.,Shi,H.,&Zhang,D.(2021).Over-expressionofOsJMT1enhancesthediseaseresistanceofrice.RiceScience,28,387-395.