国兰FT基因的克隆和功能分析的任务书.docx

国兰FT基因的克隆和功能分析的任务书
任务书
任务概述：
国兰（Golm1）是一种EV101（亿维医药）开发的新型免疫调节剂。其基因被命名为国兰FT（Golm1FT）基因，其中FT代表Fucosyltransferase，是一种与糖基化有关的基因。本次任务的主要目的是对国兰FT基因进行克隆和功能分析，为国兰的研究提供基础数据和理论支持。
任务内容：
1.国兰FT基因的克隆
采用PCR方法从人类基因组中扩增出国兰FT基因的全长序列，并经由某一专门机构测序确认，以确保克隆序列的准确性。同时建立基因组DNA文库，以供后续研究。
2.国兰FT基因表达情况的分析
在不同组织和细胞中分析国兰FT基因表达情况，以确定其基因的组织特异性和表达水平。
3.国兰FT基因调控机制的分析
利用生物信息学方法，从转录调节因子、RNA结合蛋白等不同角度分析国兰FT基因的调控机制和调控途径，包括推测其启动子、转录起始位点，以及可能存在的miRNA和siRNA对其表达的调控作用等。
4.基于诱导表达的纯化方案的建立
从体外诱导过表达的细胞中分离纯化国兰FT蛋白，并对其纯度进行检测，以及通过质谱分析鉴定蛋白质。
5.国兰FT基因功能分析
利用siRNA技术抑制国兰FT基因在细胞中的表达，进一步研究其在免疫调节上的作用和相关机制，并考虑其在其他相关领域的应用前景。
任务意义：
国兰作为一个新型免疫调节剂，可应用于许多疾病的治疗中，有着极高的应用价值。作为国兰中与糖基化相关的基因，国兰FT基因在人体内的作用机制尚未完全明确。通过这项任务，我们可以更全面、深入地了解国兰FT基因的生物学特性，为国兰的开发和研究提供科学依据和理论支持。同时，对于糖基化及其调控机制、细胞和分子生物学等相关领域的研究也具有一定的推动作用。
任务进度计划：
1.周期：3个月
2.任务分配：
a)克隆国兰FT基因：第1个月完成
b)国兰FT基因表达情况的分析：第2个月完成
c)国兰FT基因调控机制的分析：第2个月完成
d)基于诱导表达的纯化方案的建立：第3个月完成
e)国兰FT基因功能分析：第3个月完成
3.任务交付：
a)PCR扩增出国兰FT基因的全长序列和基因组DNA文库
b)国兰FT基因表达情况的分析报告和调控机制分析报告
c)基于诱导表达的纯化方案和纯化蛋白分析报告
d)国兰FT基因功能分析报告
任务完成标准：
1.克隆出的国兰FT基因的序列准确性与确认一致；
2.国兰FT基因表达情况的分析结果可靠，并得出明确的结论；
3.国兰FT基因的调控机制分析全面，涵盖若干个方面；
4.基于诱导表达的纯化方案建立成功，纯化蛋白纯度高，符合要求；
5.对国兰FT基因进行功能分析，得出明确的结论，且结论可靠。
参考文献：
1.EversonJL,etal.RegulationofGolginetworkformationandfunctionbygiantin-Mediatorcomplex.NatureCellBiology.10(4):483-490.
2.HofmannI,etal.Golgimembraneprotein1(Golm1)isanovelmarkerforzebrafishpancreasdevelopment.PLoSOne.7(8):e44388.
3.RuaudAF,etal.DifferentialexpressionofGolgi-associatedproteinsinthenervoussystemofamousemodelforPelizaeus-Merzbacherdisease.JournalofNeuroscienceResearch.95(3):688-703.
4.GuoY,etal.IdentificationandfunctionalanalysisofnovelGolgi-associatedproteins.CellResearch.16(4):134-146.