人工合成β寡糖调控天然免疫应答分子机制的研究的任务书.docx

人工合成β寡糖调控天然免疫应答分子机制的研究的任务书
任务书
一、研究目的
天然免疫系统作为哺乳动物身体最原始、最重要的防御系统，能够快速有效地识别和消灭入侵体内的微生物。其中，包括多种天然免疫细胞及其分泌的调节因子和细胞因子，起着关键作用。β-葡萄糖胺（GlcNAc）基元在天然免疫应答中发挥重要作用，可以调节关键免疫细胞如第一类抗原呈递细胞、自然杀伤细胞、单核/巨噬细胞和B细胞的信号转导以及细胞表面受体和分子的表达。其调节作用与疾病的预防、治疗等方面有着密切关系。本研究拟合成一种新的β-寡糖，以探究其在调节天然免疫应答中的效果及其机制。具体目的如下：
1.合成新型β-寡糖，并检测其结构特征。
2.研究新型β-寡糖在天然免疫应答中的调节作用及其机制。
二、研究内容
1.β-寡糖的合成：利用化学合成方法，将不同数量的葡萄糖胺分子通过β-1,3或β-1,4的键结合起来，合成一系列新型β-寡糖。
2.β-寡糖的结构鉴定：采用核磁共振（NMR）和质谱等多种手段对所合成的新型β-寡糖进行结构分析，确定其结构特征。
3.天然免疫细胞的分离和培养：将小鼠外周血中的单个核细胞和人单核细胞通过梯度离心法分离并培养。将外泌体、粘附细胞和非粘附细胞等不同类型的单核/巨噬细胞分离，并分别以其浓度匀浆，制备不同比例的共济悬液。
4.β-寡糖的作用评价：使用流式细胞术技术及适当的细胞标定方法，研究β-寡糖对第一类抗原呈递细胞、自然杀伤细胞、单核/巨噬细胞和B细胞表面受体和分子表达的调节作用。
5.β-寡糖的效应机制探究：通过Westernblotting、ELISA、PCR等多种技术，研究β-寡糖影响天然免疫信号转导的机制。
三、进度安排
1.第一年
(1)建立小鼠外周血单个核细胞的分离及氮气冷冻的培养体系；建立人外周血单核细胞的分离及培养体系，并分离粘着和非粘着单核/巨噬细胞。
(2)合成β-寡糖，并分析其结构特征。
(3)研究β-寡糖对第一类抗原呈递细胞和自然杀伤细胞表面受体和分子表达的调节作用和机制。
2.第二年
(1)研究β-寡糖对非粘着单核/巨噬细胞和B细胞表面受体和分子表达的调节作用和机制。
(2)使用Westernblotting、ELISA、PCR等技术，研究β-寡糖对天然免疫信号转导的影响机制。
(3)优化β-寡糖的化学结构，寻找更好的调节效应。
3.第三年
(1)对β-寡糖的调节效应进行定量评价，探究其与疾病的相关性。
(2)在小鼠模型中验证新型β-寡糖的调节作用和机制。
(3)撰写成果论文。
四、预期结果
1.成功合成一系列新型β-寡糖，并明确其结构特征。
2.发现β-寡糖可调节第一类抗原呈递细胞、自然杀伤细胞、单核/巨噬细胞和B细胞表面受体和分子表达的作用，并确定其信号转导机制。
3.发现β-寡糖可调节天然免疫系统信号转导中的多个关键环节，为探索天然免疫信号转导机制和相关疾病的防治提供理论指导。
4.为合成更具效应特异性的调节性β-寡糖提供基础数据。
5.对该新型β-寡糖的作用和机制进行进一步验证，以期在未来为相关疾病的治疗提供指导。
以上是本研究的任务书，本研究拟通过合成新型β-寡糖并研究其在天然免疫应答中的调节作用及其机制，为探索天然免疫信号转导机制和相关疾病的防治提供理论指导，为今后的研究提供依据和借鉴。