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鸡白痢沙门氏菌部分基因的必需性鉴定的任务书
一、任务背景
白痢沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌，能够引起人类腹泻疾病。白痢沙门氏菌的主要感染途径是通过摄入受污染的食物或水而感染。在禽畜等动物体内，白痢沙门氏菌常常是一种慢性菌群成员，使得肉类和肠道交货动物的食品安全成为关注的热点。
在许多研究中，鸡被认为是沙门氏菌的一个重要宿主。鸡菌附身可以导致人类的沙门氏菌感染，这种感染往往与食品开发、加工、储存和消费相关。因此，鸡是控制沙门氏菌食源性疾病传播的主要焦点。
随着整个食品加工、储存和消费行业的快速发展，白痢沙门氏菌的感染机制和生长途径引起了越来越多的关注。坦白地说，鸡在沙门氏菌致病机制方面的作用还不完全知晓，因此深入研究沙门氏菌在鸡内的生长机制，探究鸡菌附身过程及其对感染机制的影响，具有重要的科学意义和现实价值。
二、研究目的
本次研究的主要目的是通过分析鸡白痢沙门氏菌的部分基因序列，对其对沙门氏菌感染机制所起的必需性进行鉴定。
三、研究内容
1.文献资料调研
通过分析国际上在该领域最新的研究成果，总结归纳沙门氏菌和鸡之间的互动机制，为后续研究提供理论基础。
2.实验材料准备
从临床分离的230株鸡白痢沙门氏菌中，选取其中的20株进行基因测序，并完成其对应蛋白的表达与纯化。
3.分子生物学实验
基于PCR技术，构建鸡白痢沙门氏菌一些典型基因的克隆表达和定量蛋白水平的检测系统，探究其基因表达规律和生长规律，阐明其在感染过程中的作用。
4.基因功能分析
基于CRISPR/Cas9技术，构建针对鸡白痢沙门氏菌中关键基因的敲除系统，对敲除目标基因的沙门氏菌进行生长和感染的评估，分析敲除基因后沙门氏菌的生物学性质发生的变化。
5.细胞水平实验
采用细胞系实验探究鸡白痢沙门氏菌胞内寄生的途径和细胞内生存时间，并针对具有重要生物学功能的基因进行干扰实验，评估其对沙门氏菌感染细胞的影响。
四、研究意义
探究鸡白痢沙门氏菌部分基因的必需性鉴定，对于弄清沙门氏菌感染机制在鸡内的发生过程，针对敲除目标基因的研究，对于控制沙门氏菌食品中毒和制定防控策略有指导意义。
五、研究进展计划
该研究计划共计6个月。月度具体计划如下：
第一月：调研和文献阅读
第二月：实验材料准备和基因测序
第三至四个月：建立基于PCR技术的蛋白表达检测和基因定量检测方法
第五至第六个月：构建CRISPR/Cas9技术的沙门氏菌敲除系统，进行敲除目标基因的沙门氏菌评估
六、研究所需费用
本次研究所需费用约为50万人民币，具体包括实验物料采购、测序费用、基因克隆和表达评估费用、分子生物学实验费用、细胞水平实验费用等。