WNK1激酶和WNK4激酶对肾脏钙激活钾通道的调节作用及机制研究的任务书.docx

WNK1激酶和WNK4激酶对肾脏钙激活钾通道的调节作用及机制研究的任务书
任务书
任务名称：WNK1激酶和WNK4激酶对肾脏钙激活钾通道的调节作用及机制研究
任务背景：WNK1和WNK4激酶是一类被证实对钾离子通道具有重要调节作用的激酶。目前已有研究表明，WNK1和WNK4激酶可以通过对KCC2的调节而影响GABA能神经递质信号的传导。同时，在以往的研究中，还发现WNK1和WNK4也会对肾脏中的钾通道产生影响。具体来说，它们对肾脏中的钙激活钾通道（BK通道）的调节作用值得进一步的研究和探究。
任务目标：本次任务旨在研究WNK1激酶和WNK4激酶对BK通道的调节作用及其机制。通过探究这两款激酶的作用机理，我们可以更深入地了解它们对肾脏功能的影响和调节作用，为未来开发相关药物提供依据。
任务内容：
1.确定合适的实验模型：该项研究明确了需要使用肾脏细胞系和小鼠模型来探究WNK1激酶和WNK4激酶对BK通道的调节作用及机制。
2.实验设计：首先，需要确立各组实验条件，并确定需要进行的实验操作。其次，要对于各组实验所需要的试剂和仪器设备进行检查和准备。
3.体内基因编辑：通过CRISPR/Cas9技术来编辑小鼠的基因，从而得到不同表达水平的WNK1和WNK4的小鼠模型。
4.体外实验：使用肾脏细胞系，通过荧光共振能量转移技术来确定BK通道与WNK1和WNK4的互作关系。
5.体内实验：将各种不同基因表达水平的小鼠暴露在不同的环境下，对其肾脏进行生理学检测，包括尿量、血肌酐、尿酸等，进一步探究WNK1和WNK4调节BK通道的作用机制。
6.数据分析：将实验所得数据进行收集、分析和解读，得到WNK1和WNK4调节BK通道的作用机制，总结这两款激酶对肾脏功能的影响。
任务计划：
任务起止时间：2021年8月1日~2022年4月1日
任务计划：
|任务名称|计划时间|任务内容|
|-|-|-|
|确定合适的实验模型|8月1日~8月15日|确定所需的肾脏细胞系、小鼠模型和荧光共振能量转移技术|
|实验设计|8月15日~9月1日|确定各组实验条件，检查并准备所需试剂和仪器设备|
|体内基因编辑|9月1日~10月1日|使用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠基因|
|体外实验|10月1日~12月1日|使用肾脏细胞系进行荧光共振能量转移实验|
|体内实验|12月1日~3月1日|将小鼠暴露在不同环境下，进行肾脏生理学检测|
|数据分析|3月1日~4月1日|将实验所得数据进行收集、分析和总结|
任务费用：本次任务预算总费用为100万元。
任务执行单位：中国科学院生物物理研究所。
任务执行人员：
-项目负责人：李博，中国科学级研究员，生物物理学家，从事离子通道及神经系统疾病的基础研究。
-研究人员：张三、李四、王五、赵六，有相关研究经验和技能的研究人员，分别负责不同实验的进行和数据的收集和分析。