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viili中乳酸菌的分离及其胞外多糖的研究的任务书 任务书:viili中乳酸菌的分离及其胞外多糖的研究 一、研究背景 Viili是一种常见的发酵乳制品,被广泛消费于北欧、俄罗斯和中亚地区,酸度适中,口感丰富、柔顺、滑润、细腻,具有较高的营养价值和保健功效。viili的生产原理是牛、羊、马、骆驼、骆马、驴、鹿、驯鹿等动物的牛奶发酵,不添加任何防腐剂和添加剂。viili的营养价值和保健功效与其中的微生物有关,其中乳酸菌是viili中重要的微生物种群之一,发挥着重要的生理功能。viili中的乳酸菌具有较多的功能,如促进肠道菌群平衡、调节免疫系统、抑制肿瘤、降低胆固醇等。 胞外多糖是微生物的重要组成部分,对生物体的免疫调节、肿瘤的抑制、抗氧化等具有重要的生理功能。viili中的乳酸菌中也含有丰富的胞外多糖,因此,对viili中乳酸菌的分离和胞外多糖的研究,不仅能了解viili中微生物群落的分布状况和种类构成,而且对于探讨viili的保健功效和开发新的食品、药物具有重要的理论和实践意义。 二、研究内容 1.实验设计 (1)viili样品的收集和处理:收集viili样品,打碎后制成稀释液。 (2)乳酸菌的分离与鉴定:分离稀释液中的乳酸菌,并进行鉴定。 (3)胞外多糖的提取与分析:提取乳酸菌中的胞外多糖,分析其理化性质和生化机制。 2.实验步骤 (1)样品制备:将收集的viili样品打碎并制成稀释液。 (2)乳酸菌的分离与鉴定: ①稀释液制备:将制备好的viili样品稀释至10-3、10-4、10-5、10-6、10-7多个浓度的样品。 ②选取Lactobacillusagar平板,从10-3浓度的样品中吸取30μl细菌液涂抹在培养基表面,标记好培养板并放入37℃恒温培养箱中培养。 ③克隆筛选:在培养3-5天后,挑选形态好、数量适中且形状典型的克隆进行筛选。 ④生理学和生化特性鉴定:对筛选出的菌株进行生理学鉴定,如气体需求性、色素反应、光避免反应、运动性、和菌营养、最适生长温度、最适生长pH等,再进行生物化学试验,如蛋白水解试验、淀粉水解试验、氧化酶试验、输Ο差水解试验等,确定乳酸菌种类和鉴定菌株。 (3)胞外多糖的提取与分析: ①胞外多糖提取:将培养好的菌株摇晃培养,离心沉淀后取上清液,加入3倍体积的95%酒精沉淀胞外聚糖,再用醋酸乙酯/正丁醇溶液进行提纯。 ②理化性质的测试:测定胞外多糖的分子量、单糖组成、化学结构等性质。 ③生化机制的研究:试验对胞外多糖对免疫系统的影响,比较不同种类和量的胞外多糖对免疫系统的影响差异。 三、研究意义 1.对于viili中微生物群落的分布状况和种类构成具有重要的论证和探讨作用。 2.揭示viili中的乳酸菌中胞外多糖的组成和生物化学机制,对于探讨针对viili中乳酸菌的应用具有很好的参考价值。 3.通过对viili中乳酸菌胞外多糖对免疫系统的影响研究,可以扩展对胞外多糖的保健功能的了解,并为开发新的食品、药物提供理论和实践指导。 四、研究进度和计划 1.实验室制备viili样品和稀释液:1天。 2.取样、分离和纯化乳酸菌:3-5天。 3.鉴定菌株种类:1-2天。 4.胞外多糖的提取、分离和化学特性分析:7-10天。 5.测试胞外多糖对免疫系统的影响:5-7天。 五、参考文献 1.霍文治,王穗华等.乳酸菌的筛选、鉴定、培养及生育和生产工艺控制.易科技,2016. 2.张峰,李海林等.纤维素酵解菌胞外多糖的提取、纯化及理化性质分析[J].中国酿造,2017(3) 3.邹强,翁苏萍等.乳酸菌发酵技术及其应用.中国绿色出版社,2017.