荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因多态性与隐性乳房炎相关性研究的任务书.docx

荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因多态性与隐性乳房炎相关性研究的任务书
任务名称：荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因多态性与隐性乳房炎相关性研究
任务背景及意义：
隐性乳房炎是一种常见的疾病，也是生产牛奶中一个重要的问题。荷斯坦奶牛是我国常见的奶牛品种之一，但该品种易患乳房炎，对生产和养殖造成很大的影响，因此需要深入研究其发病机制，寻找预防和治疗方法。
BoLA-DRB3基因是荷斯坦奶牛中一个具有高度多态性的基因，其编码的MHCII分子在免疫系统中发挥着重要作用，参与调节和识别外来抗原质和T细胞的免疫应答。因此，研究该基因的多态性与隐性乳房炎的相关性，可以更好地了解荷斯坦奶牛的免疫系统和乳房炎发病机制，为研发相关的治疗和预防策略提供理论基础。
任务目标：
1、采集荷斯坦奶牛乳房炎患者和健康个体的血样和乳样，提取DNA和mRNA。
2、根据BoLA-DRB3基因多态性区域序列特征确定引物和探针，设计PCR引物、测序探针和FQ-PCR检测。
3、使用PCR和测序技术，对荷斯坦奶牛乳房炎患者和健康个体的BoLA-DRB3基因多态性进行分析和鉴定。
4、使用FQ-PCR技术，检测荷斯坦奶牛乳房炎患者和健康个体中BoLA-DRB3基因的表达水平，比较两组的差异。
5、分析BoLA-DRB3基因多态性和表达水平与荷斯坦奶牛隐性乳房炎的相关性，进行统计学分析，从而找到潜在的遗传因素和分子机制。
6、撰写实验报告，总结研究结果，提出相应建议和未来研究方向。
方法和步骤：
1、采集荷斯坦奶牛患者和健康个体的血样和乳样，分离和提取DNA和mRNA。
2、根据BoLA-DRB3基因多态性区域序列特征确定引物和探针，设计PCR引物和测序探针，检验其特异性和灵敏度。
3、用PCR技术扩增荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因的多态性区域，分离和纯化目标片段，然后进行测序验证。
4、在PCR扩增片段上标记荧光探针，基于FQ-PCR技术，检测荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因的表达水平。
5、对收集的数据进行统计学分析，比较荷斯坦奶牛隐性乳房炎患者和健康个体中BoLA-DRB3基因的多态性和表达水平的差异。
6、比较差异显著的位点和水平，与乳房炎症的发生和严重程度建立相关性分析，找到潜在的遗传因素和分子机制。
7、最后，从分子水平、免疫学水平和遗传水平等方面，总结实验结果，提出相应研究结论和未来研究方向。
预期成果：
1、荷斯坦奶牛BoLA-DRB3基因多态性和表达水平与隐性乳房炎的相关性分析。
2、为防治荷斯坦奶牛乳房炎提供理论基础和实验依据。
3、探讨荷斯坦奶牛免疫调节、免疫耐受性和遗传疾病等的机制。
4、为牛奶产品的生产质量和安全性提供依据和保障。
参考文献：
[1]ZhangXF,WangYD,GuoLQ.PolymorphismoftheBoLA-DRB3geneinChineseindigenouscattle[J].Journalofgeneticsandgenomics,2007,34(3):273-280.
[2]ZhangXF,WangYD,LiuYH.AssociationofBoLA-DRB3allelicdiversitywithsusceptibilitytobovinetuberculosisinChineseHolsteincattle[J].Veterinaryimmunologyandimmunopathology,2010,135(1-2):98-105.
[3]LiuL,ZhangX,LiuY,etal.CorrelationofserumcytokineconcentrationswithgenepolymorphismsandexpressionprofilesofToll-likereceptorsindairycowswithsubclinicalmastitis[J].Journalofdairyscience,2013,96(7):4256-4267.