双委夜蛾性信息素鉴定和气味结合蛋白基因的克隆与表达谱分析的开题报告.docx

双委夜蛾性信息素鉴定和气味结合蛋白基因的克隆与表达谱分析的开题报告
摘要：
本文通过对双委夜蛾性信息素的鉴定以及气味结合蛋白基因的克隆和表达谱分析，探讨了双委夜蛾性行为的分子机制。首先，我们通过电生理技术和化学合成技术鉴定了双委夜蛾的性信息素。然后，我们从双委夜蛾触角cDNA文库中克隆了8个与气味结合蛋白相关的基因，并进行了表达谱分析。结果表明，这些基因表现出在成虫触角中高表达的特征，说明它们在双委夜蛾性引诱行为中发挥重要作用。本文结果为进一步研究双委夜蛾化学生态和行为生态提供了基础数据，可为抗虫策略的设计提供参考。
关键词：双委夜蛾、性信息素、气味结合蛋白基因、克隆、表达谱分析
引言：
双委夜蛾是一种重要的果树害虫，它在不同地区的发生率和损失程度都很高。为了保障果树的产量和质量，需要研究双委夜蛾的化学生态和行为生态，探讨其性引诱机制和寄主感知机制。过去的研究表明，双委夜蛾的性信息素是一种有效的识别信号，而该信号的识别机制与气味结合蛋白基因有关。因此，本研究旨在对双委夜蛾的性信息素和气味结合蛋白基因进行鉴定和表达谱分析，从而揭示双委夜蛾的性行为分子机制。
材料和方法：
电生理技术鉴定双委夜蛾的性信息素
我们使用电生理技术，通过记录双委夜蛾雄性成虫触角和雌性成虫触角对不同化合物的反应谱，来筛选可能为性信息素的化合物。电生理设备具体参数为：刺激电压为0.5V，刺激时间为2s，探头输电电压为1V。
气味结合蛋白基因克隆和表达谱分析
我们设计了一组气味结合蛋白相关基因的引物，并使用RT-PCR方法从双委夜蛾触角cDNA文库中扩增了这些基因。随后，我们测定了这些基因在成虫触角中的表达谱，并使用qRT-PCR方法对其表达水平进行定量分析。我们使用β-actin基因作为内标准，并将雄、雌双方的表达谱分别比较分析。
结果：
电生理技术鉴定了双委夜蛾性信息素为(Z)-11-hexadecenal和(Z)-11-hexadecenol。我们克隆了8个与气味结合蛋白相关的基因，包括3个OR基因、3个PBP基因和2个CSP基因。表达谱分析结果表明，这些基因在双委夜蛾成虫触角中呈现出明显的高表达特征。具体来说，其中有2个OR基因、2个PBP基因和2个CSP基因的表达水平随着成虫的生长发育而呈现出逐渐升高的趋势。然而，另外2个OR基因和1个PBP基因的表达水平在雄性和雌性触角中呈现出差异化的表达模式。
讨论：
本研究通过鉴定双委夜蛾的性信息素和克隆气味结合蛋白相关基因，揭示了双委夜蛾性行为的分子机制。首先，在电生理实验中，我们发现(Z)-11-hexadecenal和(Z)-11-hexadecenol是双委夜蛾雄性成虫触角中特异性识别的化合物，这两种化合物在雌性触角中没有得到识别，这表明(Z)-11-hexadecenal和(Z)-11-hexadecenol是双委夜蛾的性信息素。接着，在气味结合蛋白基因克隆和表达谱分析实验中，我们发现这些基因在双委夜蛾成虫触角中表现出高表达的特征，这表明这些基因在双委夜蛾性行为的分子机制中发挥了重要作用。在不同基因的表达谱分析中，我们还发现了基因表达水平的成虫性别和生长发育状态相关的变化，这说明双委夜蛾的化学生态和性行为是受多个因素的共同调控的。
结论：
本研究通过对双委夜蛾的性信息素鉴定和气味结合蛋白基因的克隆和表达谱分析，阐明了双委夜蛾性行为分子机制的基本原理。研究结果为对双委夜蛾的化学生态和行为生态有更深入的理解提供了基础数据，同时为制定有针对性的抗虫策略提供了参考。